人胚腎細(xì)胞(293FT）細(xì)胞介紹
該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原，并且促進zui適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。
細(xì)胞特性
1)來源：腎
2)形態(tài)：圓形，懸浮生長
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
人胚腎細(xì)胞(293FT）細(xì)胞接受后的處理：
1.收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4. 如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附 帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉谩?/p>
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號11995-065)，90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37°C，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中（水面要低 于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入lmL培 養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。 第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
人胚腎細(xì)胞(293FT）對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加 l-2mL培養(yǎng)液后吹句，將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì) 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì) 胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
注意事項：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染， 請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作， 并請注意防護，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人胚腎細(xì)胞(293FT）細(xì)胞用途：僅供科研使用。
