科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
英文名稱：Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名：科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
檢測(cè)種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬
用途：定量檢測(cè)試劑盒，于測(cè)定血清、血漿、組織和相關(guān)液體樣本中的含量或者活性,
產(chǎn)品詢價(jià)：您可以通過(guò)、郵件、傳真或在線客戶方式詢價(jià)
產(chǎn)品特點(diǎn)：是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢。,
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床
規(guī)格：96T/48T
存儲(chǔ)條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
所需樣本體積： 50-100ul
反應(yīng)時(shí)間： 1-5h
檢測(cè)波長(zhǎng)： 450 nm
檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
用途： For research use only. Not for diagnostic use.（只能用于科研，不可用于臨床診斷）
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科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
一、雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
二、間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；
2.次日洗滌3次；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；
4.（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；
6.zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
血清：全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。血漿：抗凝劑*使用EDTA，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。其它生物標(biāo)本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，6個(gè)月內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。 如果樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù))。
酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL,200-1000μL37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水。
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