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廣電計(jì)量檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司

p21/CIP1/CDKN1A ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)

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  • 公司名稱上海蔚霆生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號(hào)
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間2016/6/14 22:44:46
  • 訪問(wèn)次數(shù)143
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 上海蔚霆生物科技有限公司是一家是一家集銷售、技術(shù)服務(wù)于一體的高科技公司。專業(yè)經(jīng)營(yíng)各類品牌Elisa試劑盒、血清、生物試劑、抗體、耗材等生物產(chǎn)品,公司堅(jiān)持以“高科技、高品質(zhì)、高服務(wù)”的經(jīng)營(yíng)理念原則,在市場(chǎng)上樹(shù)立了公司的良好信譽(yù)和形象。您可以致電021--31665985(QQ:815983355),我們將利用專業(yè)知識(shí)來(lái)有效協(xié)助廣大科研人員在各自領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)研究工作。

ELISA試劑盒、細(xì)胞因子、抗體、血清、生物試劑
p21/CIP1/CDKN1A ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)
上海蔚霆生物科技有限公司*提供各種種屬、各種系列ELISA檢測(cè)試劑盒,價(jià)格實(shí)惠,質(zhì)量有保證,信譽(yù)*。索取各ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書。凡購(gòu)買目錄本公司ELISA檢測(cè)試劑盒可免費(fèi)提供代測(cè)服務(wù)。如需訂購(gòu),請(qǐng)點(diǎn)擊左上角的()進(jìn)行咨詢
p21/CIP1/CDKN1A ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品信息

貨號(hào):WT-E7912    【p21/CIP1/CDKN1A ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)】咨詢和訂購(gòu):如需訂購(gòu),請(qǐng)點(diǎn)擊左上角的()進(jìn)行咨詢,我們會(huì)盡快跟您!

ELISA試劑盒組成及試劑配制(以下為ELISA試劑盒通用說(shuō)明書,不包括特別的試劑盒,具體的請(qǐng)參照每個(gè)產(chǎn)品的說(shuō)明書 索取!)

1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml50 pg/ml,25 pg/ml12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。【p21/CIP1/CDKN1A ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)】

3. 樣品稀釋液:1×20ml

4. 檢測(cè)稀釋液A1×10ml。

5. 檢測(cè)稀釋液B1×10ml

6. 檢測(cè)溶液A1×120μl1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測(cè)溶液A990μl檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

7. 檢測(cè)溶液B1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A

8. 底物溶液:1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

11. 覆膜:5

12. 使用說(shuō)明書:1

【】自備物品

1. 酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說(shuō)明提前預(yù)熱)

2. 微量加液器及吸頭,EP

3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙

標(biāo)本的采集及保存

1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4一夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4. 樣本處理:血清或血漿標(biāo)本*稀釋5,000倍。

注:以上標(biāo)本置4保存應(yīng)小于1周,-20-80均應(yīng)密封保存,-20不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月,-80不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月;標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

【】操作步驟

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。【】

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