生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱:PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)
英文名稱:PAGE protein staining kit
產(chǎn)品規(guī)格:250ml|1000ml
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164912
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于快速檢測PAGE膠上的微量蛋白質(zhì),它的敏感度幾乎可以達到銀染的敏感度(ng級水平或者更高),但是比銀染簡單、穩(wěn)定、重復(fù)性高。染色液所含有的成份和PAGE膠中的SDS、TRIS共同作用形成特殊復(fù)合物沉淀在膠基質(zhì)中形成白色的背景染色。有蛋白的地方,蛋白質(zhì)的存在干擾這種復(fù)合物沉淀的形成,因此蛋白條帶仍舊保持透明無色,在黑色的背景下,就可以清晰見到透明的蛋白條帶。 產(chǎn)品特點: 1.電泳后采用兩個簡單步驟,15分鐘內(nèi)完成全部過程。 2.環(huán)保染料,*不含有各種醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。 3.蛋白條帶為不透明白背景上的透明條帶,靈敏度為傳統(tǒng)方法的10倍以上(納克級或者更高)。 4.可逆染色,*不影響蛋白性質(zhì),不影響抗體抗原結(jié)合性質(zhì)。如果需要可以脫色15分鐘后繼續(xù)做蛋白電洗脫(切下特定條帶脫色后洗脫下來可以用來做抗原使用)、定量、Western blot實驗、質(zhì)譜分析、N末端測序等。 5.在普通雙蒸水中可以保留一年以上,不退色,縮小,蛋白質(zhì)不擴散,一年后依然可以用來做Western blot等蛋白微分析。 操作步驟: 1. 染色 1) 電泳后用清水沖洗膠30-60 秒鐘,然后將PAGE 膠放置于一個透明的玻璃培養(yǎng)皿中,根據(jù)膠大小倒入適量的染色液(確保膠都浸沒在染色液內(nèi),20-25ml 足夠染色一塊普通的8×10cm mini 膠了),搖床上輕搖染色10-15 分鐘(10-15%膠15 分鐘,5-7.5%膠可縮短時間到10 分鐘)。 2) 倒棄染色液,加入20-25ml 的顯色液,立刻同時用手輕搖膠顯色0.5-1 分鐘(將透明培養(yǎng)皿放在一個黑色(暗)背景上觀察條帶出現(xiàn)情況,此時在不透明的白背景上應(yīng)該看到透明的蛋白條帶,不要顯色時間過長,過長反而會降低分辨率)。 3) 看到滿意條帶后,用清水沖洗1-2 分鐘后,放置于蒸餾水中保存。 2. 脫色 1) 根據(jù)個人需要將所需目的條帶切下后或者直接整塊膠加入適量脫色液,搖床上輕搖10 分鐘或者直到脫色*,后用清水沖洗幾次。 2) 現(xiàn)在膠可以用于蛋白電洗脫,Western blot 等操作,或者可以再用傳統(tǒng)方法染色。 儲存條件:室溫避光,有效期12個月。 本制品別名:可逆微量蛋白染色試劑盒|敏感可脫色PAGE膠蛋白染色試劑盒 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達,則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液
人血液免疫球蛋白G(IgG)免疫比濁法定量檢測試劑盒
G標(biāo)準(zhǔn)溶液
人血液免疫球蛋白M(IgM)免疫比濁法定量檢測試劑盒
M標(biāo)準(zhǔn)溶液
小鼠圍脂滴蛋白4(PLIN4)elisa ,英文名: PLIN4 ELISA Kit
兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
牛胎盤生長因子(PGF)免疫試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit
英文名稱HumanAmphiregulinELISAKit人角化細胞內(nèi)分泌因子(AR)規(guī)格:96T/48T
調(diào)料比色法定量檢測試劑盒20次
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKelisa大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白(AMPK)elisa規(guī)格:96T/48T
PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)小鼠肌鈣蛋白I(cTnI)elisa檢測試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)elisa檢測試劑盒
小鼠肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)elisa檢測試劑盒
小鼠饑餓素(GHRL)elisa檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。