實驗目的:
本試劑盒用于測定血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中誘導型一氧化氮合成酶TXB2犬血栓素B2的含量。
商品屬性:
產品名稱 | TXB2犬血栓素B2elisa試劑盒 | 英文名稱 | TXB2 ELISA Kit |
貨號 | CS-4337E | 規(guī)格 | 48T/96T |
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中TXB2犬血栓素B2。用純化的TXB2犬血栓素B2抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加TXB2犬血栓素B2,再與 HRP 標記的TXB2犬血栓素B2抗體結合,形成抗體抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TXB2犬血栓素B2呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中TXB2犬血栓素B2濃度。
檢測原理:
1. 抗原-抗體反應
ELISA的基礎是抗原-抗體反應??乖且环N能夠與抗體結合的物質,而抗體則是免疫系統產生的蛋白質,能夠識別并結合抗原??乖?/span>-抗體結合是高度特異的,因此ELISA能夠準確地檢測樣本中的抗原或抗體。
2. 酶聯免疫吸附試驗
TXB2犬血栓素B2elisa試劑盒在ELISA中,抗原或抗體被吸附在固相載體表面。常用的固相載體包括聚苯乙烯、尼龍等。載體表面經過特殊處理,可以增強其與抗原或抗體的結合能力。將酶標記的二抗加入反應體系中,二抗能夠與抗原或抗體結合,形成酶標抗原-抗體復合物。
3. 底物顯色反應
在加入底物后,酶標抗原-抗體復合物與底物發(fā)生顯色反應,產生顏色變化。底物可以是顯色劑,也可以是熒光染料。顯色反應的強度與抗原-抗體復合物的量成正比,因此可以通過測量光密度值來定量分析樣本中的抗原或抗體。
4. 終止反應
顯色反應持續(xù)一定時間后,需要加入終止液終止反應。終止液可以使酶失活,停止顯色反應。終止液一般是酸或堿溶液。
5. 檢測與分析
終止反應后,將固相載體放入多功能酶標儀中測量各孔的光密度值。通過標準曲線可以得出樣本中抗原或抗體的濃度。標準曲線是通過檢測已知濃度的標準品繪制而成的。
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注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。