Annexin V-EGFP細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒試劑盒組份:
Annexin V-EGFP—————————100μl
Annexin V-EGFP結(jié)合液——————12ml
碘化丙啶染色液—————————220μl
Annexin是一類廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白,參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰絲an酸(phosphatidylserine,簡(jiǎn)稱PS)。磷酯酰絲an酸主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期,不同類型的細(xì)胞都會(huì)把磷酯酰絲an酸外翻到細(xì)胞表面,即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰絲an酸暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰絲an酸結(jié)合后可以阻斷磷酯酰絲an酸的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針EGFP標(biāo)記的Annexin V,即Annexin V-EGFP,就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷酯酰絲an酸的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液,碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞,由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失,Annexin V-EGFP可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi),與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰絲an酸結(jié)合,從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
綜上所述,用Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色后,正常的活細(xì)胞不被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色;凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-EGFP染色,碘化丙啶染色呈陰性;壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時(shí)被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色。
儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期6個(gè)月。
產(chǎn)品名稱 | Annexin V-EGFP細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | CS-C6018 |
英文名稱 | Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit | 規(guī)格 | 20次|50次 |
本試劑盒是用EGFP標(biāo)記的重組人Annexin V來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲an酸的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測(cè)20個(gè)樣品??梢允褂昧魇郊?xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過(guò)程中,可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時(shí)宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說(shuō)明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
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