Annexin V-PE/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。

在正常細胞中，磷脂酰絲an酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂酰絲an酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS 高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得Annexin V 與PS的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標志事件。

檢測原理：

在正常的活細胞中，磷脂酰絲an酸(phosphotidylserine，PS)位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細胞中，PS 從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中。

Annexin-Ⅴ能與PS 高親和力結(jié)合。可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲an酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。用標記了PE的AnnexinⅤ作為熒光探針，利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。細胞壞死的過程中也會發(fā)生細胞膜損傷，壞死的細胞會結(jié)合Annexin V-PE。

Annexin V-PE 通常與細胞膜非滲透性核酸熒光染料聯(lián)合使用以檢測凋亡細胞。常用的染料是7-AAD。正常細胞和早期凋亡細胞的細胞膜是完整的，核酸染料7-AAD 不能透過完整的細胞膜，但在凋亡中晚期的細胞和壞死細胞，7-AAD 能夠透過細胞膜與細胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。

7-AAD/Annexin V-PE試劑盒將AnnexinⅤ與7-AAD匹配使用，可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。壞死細胞可以同時與Annexin V-PE和7-AAD 結(jié)合顯色，而7-AAD 則被排除在活細胞(PE陰性)和早期凋亡細胞(PE陽性)之外。在沒有巨噬細胞的情況下，凋亡的最后階段會像細胞壞死一樣發(fā)生整個細胞的解體，從而使凋亡晚期的細胞也同時被PE和7-AAD 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性。

儲存條件：染色液2-8℃避光保存；結(jié)合液2-8℃保存；長期不用-20℃保存。

Annexin V-PE染色液避免反復(fù)凍融，凍融2次以上可能會失效。長期保存分裝后-20℃保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品背景：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

細胞生物學研究的常用技術(shù)有哪些：

1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.

2細胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學分析技術(shù).

3.細胞工程：細胞培養(yǎng)。

注意事項：

1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當分裝保存。反復(fù)凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。

2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。

3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
公司正在出售的產(chǎn)品：