自由基(free radicals),是指帶不成對(duì)電子的原子、分子、離子或原子團(tuán)。自由基的種類很多,如以氧(O)、碳(C)、氮(N)為中心的活性基團(tuán)?;钚匝踝?/span>(reactive oxygen species, ROS)是生物體內(nèi)一些氧化反應(yīng)中形成的氧自由基,常見有超氧化陰離子(O2-),過氧化氫(H2O2),過氧化自由基(ROO-)和氫氧自由基(OH-)等形式。自由基外層具有非配對(duì)電子,其化學(xué)性質(zhì)非?;顫?,它既是電子供體,又是電子受體。
活性氧是細(xì)胞線粒體氧化呼吸中產(chǎn)生的自由基活性的物質(zhì),參與細(xì)胞多種生理和病理形成機(jī)制。檢測(cè)細(xì)胞ROS的含量,可以了解ROS在細(xì)胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化,分析藥物效應(yīng)和相關(guān)機(jī)制。
活性氧檢測(cè)試劑盒是利用ROS熒光探針-DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光,可自由透過活細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平。根據(jù)活細(xì)胞中紅色熒光的產(chǎn)生,可以判斷細(xì)胞ROS含量的多少和變化。