人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法）
僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人(ANXA5)的含量。
有效期：6個(gè)月
保存條件：2-8℃
[實(shí)驗(yàn)原理]
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人(ANXA5)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人(ANXA5)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
[說(shuō)明]
1.zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
2.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別，如：檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。
3.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到*的檢測(cè)結(jié)果。
4.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。
5.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
6.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
7.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。
在實(shí)際操作中，除了挑選優(yōu)良試劑外，有必要嚴(yán)厲依照操作過(guò)程進(jìn)行操作，一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以謹(jǐn)慎的工作作風(fēng)檢查每一份標(biāo)本，才干確保檢查質(zhì)量。ELISA試劑盒如今國(guó)內(nèi)已有適當(dāng)數(shù)量的單位具有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這關(guān)于完成ELISA規(guī)范化檢查、進(jìn)步檢查質(zhì)量起到了重要作用。
人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題解答
一、洗板
也許因素：
1) 選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，致使洗板不*；洗板針阻塞，抽吸不*；洗板不暢，致使洗板作用差。 3) 反響板過(guò)多形成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。
解決辦法：
1) 確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選潔凈、無(wú)或少塵的吸水資料）上輕輕拍干； 2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素：
1) 顯色劑制造后放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)或運(yùn)用過(guò)期顯色劑； 2) 加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。
解決辦法： 1) 顯色劑盡量在臨用前制造，堅(jiān)持不bi過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必； 2) 加樣時(shí)堅(jiān)持顯色劑不外流； 3) A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時(shí)發(fā)生較多氣泡，致使假陽(yáng)性添加。所以在加停止液時(shí)應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時(shí)板底不清洗等。應(yīng)確保酶標(biāo)板清洗。所以在全部操作過(guò)程中確保酶標(biāo)板不觸摸次氯酸； 盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動(dòng)化，有用進(jìn)步檢查質(zhì)量。
[注意事項(xiàng)]
1.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4.底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5.避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6.在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9.不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
