商品介紹:
kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測(cè)試劑盒,細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測(cè)試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧niao嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測(cè)是基于“點(diǎn)擊”反應(yīng),一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價(jià)反應(yīng)。本試劑盒中,EdU試劑含有炔烴,而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點(diǎn)擊法的EdU標(biāo)記增殖快速有效,易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標(biāo)記出整合的EdU。標(biāo)準(zhǔn)化的固定和去污劑促滲可以使檢測(cè)試劑進(jìn)入細(xì)胞,而brdu方法則需要DNA變性(如酸變性、熱變性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,從而方便BrdU抗體結(jié)合。 |
中文名稱:kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(流式)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T
產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01X6430
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
無孢蛋白(ASPN)英文名稱:ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml
吻受體(KISS1R)英文名稱:KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml
吻1(KISS1)英文名稱:KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名稱:GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體包裝5g
胃泌(GT)英文名稱:GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g
胃蛋白原C(PGC)英文名稱:PGC ELISA Kit上皮類癌相關(guān)抗原抗體包裝25g
胃蛋白原A(PGA)英文名稱:PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱:TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g
尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱:UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g
維生D受體(VDR)英文名稱:VDR ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g
維生D結(jié)合蛋白(DBP)英文名稱:DBP ELISA Kit8號(hào)染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g
維生B9(VB9)英文名稱:VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg
維X受體α(RXRα)英文名稱:RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g
圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱:PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g
微粒體S轉(zhuǎn)移1(MGST1)英文名稱:MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體包裝5g
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白G試劑盒風(fēng)疹病IgG抗體參考品
銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風(fēng)疹病IgM抗體參考品
筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯維生B12Elisa
白酒 酒精度 3,4,5-三噠維生B2Elisa
桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯維生B6Elisa
線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮維生CElisa
枯草芽孢桿 4-苯乙維生DElisa
紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維生D2Elisa
釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽維生D3Elisa
塔賓曲霉 4--3-乙基維生D受體Elisa
釀酒酵母 單水合物維生EElisa
pAAV-RC2 4--2-氟苯磺酰維生K1Elisa
蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維生K2Elisa
光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓Ⅱ相關(guān)肽Elisa
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓IIElisa
草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-AgElisa
雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標(biāo)志物CA199Elisa