保藏亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,條件下培養(yǎng)至菌種長(zhǎng)出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟,使其覆蓋整個(gè)斜面,再直立放置于低溫(4~6℃)干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。
產(chǎn)品名稱 | 用途 | 產(chǎn)地 | 貨號(hào) |
釀酒酵母說(shuō)明書 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 | 中國(guó)/美國(guó) | CS-01J9322 |
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
菌種的使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,釀酒酵母菌組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
埃切畢赤酵母
近平滑假絲酵母
解脂假絲酵母
熊蜂生假絲酵母
漢遜德巴利酵母
熱帶假絲酵母
糠秕馬拉色菌(糠秕孢子菌)
博伊丁假絲酵母
伯頓畢赤酵母
Pyxidicoccusfallax
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)
創(chuàng)傷弧菌
嗜酸乳桿菌
Oleispiraantarctica
Sphingomonaspituitosa
Sphingomonastrueperi
彎曲乳桿菌
產(chǎn)酸克雷伯氏菌
小孢囊桿菌
大孢珊瑚球菌
葉柄粘球菌
ARFRP1 ADP核糖基化因子相關(guān)蛋白1
Argininosuccinate Lyase 琥珀酸裂解酶抗體
Arginyl tRNA synthetase 精氨酰tRNA合成酶抗體
Argonaute 3 真核翻譯起始因子2C3抗體
Argonaute 4 真核翻譯起始因子2C4抗體
ARHGAP15 Rho GTP酶激活蛋白15抗體
ARID1B 抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體
ARIH2 E3連接酶蛋白ARIH2抗體
ARFL1 ADP核糖基化樣因子1抗體
ARL4 ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體
ARP2 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體
ARPC2 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2抗體
釀酒酵母說(shuō)明書ARPC4 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體
ARSI 芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
ART1 抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體
ARVCF 精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體
ALDH1 乙醛脫氫酶1型抗體
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。菌種發(fā)酵