保藏亦稱(chēng)礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,條件下培養(yǎng)至菌種長(zhǎng)出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟,使其覆蓋整個(gè)斜面,再直立放置于低溫(4~6℃)干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 用途 | 產(chǎn)地 | 貨號(hào) |
Oleispiraantarctica | 公司產(chǎn)品僅用于科研 | 中國(guó)/美國(guó) | CS-01J9344 |
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
菌種的使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,釀酒酵母菌組成成分精確,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi),或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
人血小板因子4Bacillus subtilis subsp. subtilisUDP葡糖酸基轉(zhuǎn)移1家族多肽A1檢測(cè)試劑盒
人功能相關(guān)抗原2Bacillus subtilis subsp. subtilis登革熱病NS1抗原檢測(cè)試劑盒
人白三烯E4Bacillus subtilis subsp. subtilis金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白13檢測(cè)試劑盒
人D二聚體Bacillus subtilis subsp. subtilisC1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9檢測(cè)試劑盒
人球蛋白EBacillus subtilis subsp. subtilis抗人類(lèi)缺陷病抗體檢測(cè)試劑盒
人髓系觸發(fā)受體-1Bacillus subtilis subsp. subtilis硫酸肝素糖蛋白檢測(cè)試劑盒
人白調(diào)節(jié)素Bacillus subtilis subsp. subtilis纖抗體檢測(cè)試劑盒
人血小板生成素Bacillus subtilis subsp. subtilisN末端B型鈉尿肽檢測(cè)試劑盒
Oleispiraantarcticaβ-環(huán)糊精 96%(II)激活肽1抗體
2-吲哚 98%(II)激活肽2抗體
吡-2,3-二羧 97%Tafazzin蛋白抗體
3-吲哚 98%TEC酪氨激蛋白抗體
2,3,5-吡 99%鈣轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
7-氨吲哚 97%金屬蛋白組織抑制因子-2抗體
2-并咪唑乙 97%腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體
5-溴-7-硝二氫吲哚 98%腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體
5-溴代吲哚 98%轉(zhuǎn)抗體
4-溴吲哚 98%TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12抗體
5-吲哚 99%轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體
5--1,3,3--2-亞吲哚啉 90%兔抗?fàn)钕偾虻鞍?/span>
7-喹哪啶 99%腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體
2-()并咪唑 96%瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體
1,2-二吲哚 99%腫瘤抑制轉(zhuǎn)移候選因3抗體
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。