廣州檢驗(yàn)科PCR實(shí)驗(yàn)室裝修設(shè)計(jì)
從PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局、通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)兩個方面進(jìn)行設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析，供設(shè)計(jì)和建設(shè)單位的相關(guān)人員參考。
PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析
1、平面功能分區(qū)要點(diǎn)分析
根據(jù)《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》1.1條的要求，PCR實(shí)驗(yàn)室一般由試劑儲備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)4個區(qū)域組成。
PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的設(shè)置并不是一成不變的，以下幾種情況需要說明：
①如果樣本在擴(kuò)增之前需要粉碎處理，則需要增加一個區(qū)域用于樣品的粉碎;
②如果采用實(shí)時熒光PCR法，則擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū);
③如果采用全自動化PCR分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個區(qū)。
以4個區(qū)域的實(shí)驗(yàn)室設(shè)置進(jìn)行設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析，如圖所示。
▲圖1 典型PCR 實(shí)驗(yàn)室工藝平面圖
2、實(shí)驗(yàn)室功能與設(shè)備設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析
(1)試劑儲備區(qū)
該區(qū)域主要完成試劑和主反應(yīng)混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運(yùn)送到該區(qū)域的試劑和材料不應(yīng)經(jīng)過其他區(qū)域，試劑和原材料應(yīng)在本區(qū)內(nèi)儲存和制備。本區(qū)域的氣壓應(yīng)相對外界保持正壓。該區(qū)域的設(shè)備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機(jī)、加樣器、可移動紫外燈等。由于該區(qū)域有多種試劑，所以“安全"應(yīng)是平面設(shè)計(jì)首要考慮因素，平面設(shè)計(jì)時應(yīng)保持通風(fēng)流暢、逃生暢通。首先，實(shí)驗(yàn)臺布置在房間的兩側(cè)，中間的過道全部通向走廊便于疏散。同時根據(jù)人體工程學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)臺與實(shí)驗(yàn)臺通道設(shè)計(jì)為1500mm，中間的通道可滿足兩邊坐人中間過人的要求。
(2)標(biāo)本制備區(qū)
該區(qū)域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成。樣本應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)并儲存在本區(qū)內(nèi)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。對于氣流壓力的控制，由于在本區(qū)內(nèi)加樣操作可能產(chǎn)生氣溶膠，為避免氣溶膠擴(kuò)散出去對外界造成污染，本區(qū)應(yīng)對外界保持負(fù)壓;同時本區(qū)相對于擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)以及擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)為正壓，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。
該區(qū)域的設(shè)備主要是生物安全柜、加樣器、臺式高速離心機(jī)、臺式低速離心機(jī)、水浴鍋、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。其中需要注意的是，生物安全柜.好選用B2型，這種生物安全柜所有的吸入氣流和垂直氣流都經(jīng)過高效過濾器過濾后排到室外，不再進(jìn)入生物安全柜循環(huán)或者返回該區(qū)域，這種生物安全柜可避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本之間交叉“污染"，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
(3)擴(kuò)增區(qū)
該區(qū)域的功能是DNA擴(kuò)增和擴(kuò)增片段的測定。此外，反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液和已制備的DNA模板(來自標(biāo)本制備區(qū))的加入等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。對于氣流壓力的控制，相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。
該區(qū)域的設(shè)備主要是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀、加樣器、超凈臺等。其中熱循環(huán)儀的電源應(yīng)，并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動對擴(kuò)增測定的影響。
(4)分析區(qū)
該區(qū)域的功能是擴(kuò)增產(chǎn)物的分析。該區(qū)域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。對于氣流壓力的控制，該區(qū)域是PCR實(shí)驗(yàn)的后一步，壓力應(yīng)為.低，相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。
該區(qū)域的設(shè)備主要是加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。
3、人流與物料流線設(shè)計(jì)要點(diǎn)分析
進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域工作人員應(yīng)該按照以下路徑：
走道→緩沖間→實(shí)驗(yàn)區(qū)
工作人員退出實(shí)驗(yàn)室的路徑為：
實(shí)驗(yàn)區(qū)→緩沖間→走道
進(jìn)入各個區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。這種人員的單向流動可以降低因人員的流動帶來的交叉污染風(fēng)險。
所有的物品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)必須經(jīng)過雙扉互鎖傳遞窗，利用傳遞窗消毒后才可進(jìn)入，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有物品也必須經(jīng)過傳遞窗才可以傳遞到實(shí)驗(yàn)室以外的清潔公共區(qū)。這種物品有組織的單向流動可以降低物品的差錯和混淆的風(fēng)險。
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