將少量樣品放置在臺(tái)式離心機(jī)內(nèi),然后操作臺(tái)式離心機(jī),使得離心力引起隨機(jī)分布的生物分子從旋轉(zhuǎn)中心徑向向外遷移穿過(guò)溶劑。分析離心可用于測(cè)定大分子的純度。它也可以用于檢查超分子復(fù)合物分子量的變化。此外,它可以確定天然狀態(tài)下的溶質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量。密度梯度離心是分子的分離,其中分離基于分子在離心力下通過(guò)密度梯度時(shí)的分子密度。密度梯度離心基于以下原理:分子在離心力作用下沉降直至到達(dá)密度與它們相同的介質(zhì)。在這種情況下,使用具有密度梯度的介質(zhì),該介質(zhì)必須減小密度或增大密度。當(dāng)樣品旋轉(zhuǎn)時(shí),樣品中的分子會(huì)穿過(guò)介質(zhì),從而產(chǎn)生離心力,當(dāng)密度更高的分子通過(guò)密度梯度時(shí),它們開(kāi)始向底部移動(dòng)。然后,分子在顆粒密度等于周?chē)橘|(zhì)的點(diǎn)處懸浮,以這種方式,具有不同密度的分子在不同的層上分離,然后可以通過(guò)各種方法進(jìn)行回收。通過(guò)在離心管中輕輕放置較低濃度到較高濃度來(lái)創(chuàng)建介質(zhì)的密度梯度。然后將樣品置于梯度上方,并將試管置于低速自動(dòng)平衡離心機(jī)TDZ4-WS中,粒子穿過(guò)梯度,直到達(dá)到其密度與周?chē)橘|(zhì)的密度匹配的點(diǎn),除去和分離級(jí)分,獲得作為分離單元的顆粒。
密度梯度離心可用于純化大量生物分子。差速離心是一種離心過(guò)程,其中通過(guò)施加一系列增加的離心力將組分分別沉降到離心管中,差異離心是基于不同大小和密度的生物顆粒沉降速率的差異。當(dāng)施加增加的離心力時(shí),較大分子的初始沉淀發(fā)生。取決于單獨(dú)離心步驟的速度和時(shí)間以及顆粒的密度和相對(duì)尺寸,其他顆粒沉降下來(lái)。種類(lèi)的顆粒在離心管底部形成沉淀,在上清液中留下較小尺寸的結(jié)構(gòu)。因此,較大的分子以較低的離心力快速沉降,而較小的分子則需要較長(zhǎng)的時(shí)間和較高的力,如果顆粒的密度小于介質(zhì)密度,則顆粒會(huì)漂浮而不是沉降。將樣品溶液在含有緩沖液的培養(yǎng)基中勻漿。然后將樣品放入離心管中,該離心管在特定溫度下以特定離心力運(yùn)行特定時(shí)間。在該操作結(jié)束時(shí),將在管的底部形成沉淀,將其與上清液分離。將上清液添加到新的離心管中,在該離心管中以另一種速度離心特定的時(shí)間和溫度。再次,將上清液與形成的沉淀分離。繼續(xù)這些步驟,直到所有顆粒彼此分離。然后可以通過(guò)測(cè)試特定顆粒的指示劑來(lái)識(shí)別顆粒。差速離心通常用于分離細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞器和細(xì)胞膜,它還可以用于核的低分辨率分離。由于此技術(shù)可根據(jù)粒徑分離顆粒,因此可用于純化含有較大雜質(zhì)的提取物。等滲離心是一種離心類(lèi)型,其中當(dāng)離心力施加到樣品上時(shí),樣品中的顆粒根據(jù)其密度分離。等滲離心也稱(chēng)為平衡離心,因?yàn)轭w粒的分離僅根據(jù)其密度而不是根據(jù)其大小進(jìn)行。
粒子向底部移動(dòng),并且移動(dòng)基于粒子的大小。并且,一旦顆粒的密度變得等于周?chē)橘|(zhì)的密度,流動(dòng)就停止,隨著我們將管子向下移至底部,梯度中的密度增加。結(jié)果,具有較高密度的顆粒在底部沉降,然后是密度較小的顆粒,這些顆粒在密度較大的顆粒上方形成帶。它被認(rèn)為是真正的平衡,因?yàn)檫@直接取決于浮力密度而不是顆粒的大小。準(zhǔn)備一個(gè)密度逐漸增加的梯度,其朝向管的底部。也可以使用預(yù)先執(zhí)行的梯度。生物樣品和鹽的溶液均勻地分布在離心管中并置于離心機(jī)內(nèi)部。一旦離心機(jī)開(kāi)始運(yùn)行,在管中形成鹽的密度梯度。粒子沿著管子向下移動(dòng),并隨著它們以各自的密度到達(dá)該區(qū)域而沉降。然后使用不同的其他過(guò)程分離和識(shí)別顆粒。等滲離心可用于純化大量生物分子,該技術(shù)可以用作確定各種粒子的密度的技術(shù)。區(qū)域密度梯度離心是一種將顆粒根據(jù)其形狀作為大小進(jìn)行分離的離心方法,并按照相同的密度梯度離心原理進(jìn)行工作,但工作方式不同。也稱(chēng)為移動(dòng)區(qū)離心。程序是將樣品放在預(yù)先澆注的密度梯度上方的限制區(qū)域中。然后將密度梯度離心。所有粒子都遷移到密度梯度中,因?yàn)槊芏忍荻鹊拿芏葍H比被離心分離的顆粒的密度低得多。顆粒主要通過(guò)尺寸和形狀分級(jí)。顆粒越大,沉積越快。顆粒的球形對(duì)稱(chēng)性越高,則沉積越快。顆粒以其沉降系數(shù)的函數(shù)的速率通過(guò)梯度沉降。與差速離心不同,在樣品的整個(gè)區(qū)域中分布有樣品,在速率區(qū)域離心中,樣品最初僅以梯度形式出現(xiàn)在梯度的頂部。在施加樣品之前,在離心管中制備密度梯度。然后將它們以帶的形式分層放置在漸變的頂部。在離心過(guò)程中,快速移動(dòng)的顆粒(較大的顆粒和圓形的顆粒)先于較慢的顆粒運(yùn)動(dòng),以便將不同的顆粒分離為梯度的不同部分上的不同譜帶。顆粒根據(jù)其沉降系數(shù)進(jìn)行分離,并從管的底部通過(guò)穿孔獲得顆粒,上海京燦專(zhuān)業(yè)銷(xiāo)售各種實(shí)驗(yàn)室離心機(jī),離心機(jī)產(chǎn)品涵蓋低速離心機(jī)、高速離心機(jī)、冷凍離心機(jī)等等。另外還有銷(xiāo)售便攜式氣體檢測(cè)儀,品牌有德國(guó)德?tīng)柛瘛⒚绹?guó)華瑞、美國(guó)霍尼韋爾、加拿大BW、美國(guó)盟蒲安、美國(guó)英思科、日本新宇宙,其中主營(yíng)的產(chǎn)品普遍應(yīng)用在國(guó)內(nèi)各個(gè)制藥企業(yè),用于GMP認(rèn)證,這款儀器就是由德?tīng)柛竦聡?guó)工廠(chǎng)生產(chǎn)制造的德?tīng)柛駢嚎s空氣檢測(cè)儀,如有購(gòu)買(mǎi)需求,歡迎隨時(shí)咨詢(xún)!
低速自動(dòng)平衡離心機(jī)TDZ4-WS技術(shù)參數(shù):