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NADH氧化酶(NOX)試劑盒

參考價	￥510.00

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￥510.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2024/6/20 15:11:31
訪問次數(shù)248

產(chǎn)品標(biāo)簽:

NADH氧化酶(NOX)試劑盒

規(guī)格

48T

510.00元

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學(xué)、分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)、動物造模等技術(shù)實(shí)驗(yàn)，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、動物實(shí)驗(yàn)等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實(shí)驗(yàn)設(shè)計項目實(shí)施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進(jìn)水平的產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*好評。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實(shí)惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。細(xì)胞：美國*原代細(xì)胞，細(xì)胞系，細(xì)胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材。生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價格較好的競爭力。

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NADH氧化酶(NOX)試劑盒
NADH 氧化酶（NOX，EC 1.6.99.3）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，可在氧氣存在下，直接將 NADH 氧化為 NAD。

NADH氧化酶(NOX)試劑盒產(chǎn)品信息

NADH氧化酶(NOX)試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 NADH 氧化酶（NADH oxidase，NOX）試劑盒說明書（貨號：WS3080F 分光法 48 樣）一、產(chǎn)品簡介： NADH 氧化酶（NOX，EC 1.6.99.3）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，可在氧氣存在下，直接將 NADH 氧化為 NAD。該酶不僅參與 NAD 的再生，而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。 NOX 能夠?qū)?NADH 氧化為 NAD，通過檢測 NADH 于 340nm 處的下降速率，即可得出 NADH 氧化酶活性的大小。二、試劑盒組分與配制：試劑名稱規(guī)格保存要求備注試劑一液體 60mL×1 瓶 -20℃保存試劑二液體 10mL×1 瓶 -20℃保存試劑三液體 32mL×1 瓶 4℃保存試劑四粉劑×1 支 4℃保存用前甩幾下或離心使粉劑落入底部，再加 1.5mL 蒸餾水溶解備用試劑五粉劑×3 支 -20℃保存用前甩幾下或離心使粉劑落入底部，每支再加 0.5mL 蒸餾水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融，三天內(nèi)用完。三、所需的儀器和用品：紫外分光光度計、1mL 石英比色皿（光徑 1cm）、低溫臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。四、NADH 氧化酶（NOX）活性測定：建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、線粒體制備（提示：整個線粒體的提取過程須保持 4℃低溫環(huán)境）： ① 稱取約 0.2g 組織或收集 1000 萬細(xì)菌/細(xì)胞，加入 1mL 試劑一，用冰浴勻漿器或研缽冰浴勻漿，轉(zhuǎn)移至離心管后于 4℃×3000g 離心 20min。 ② 小心吸取上清液（棄沉淀）移至另一離心管中，4℃×16000g 離心 20min。用移液器移除上清液（上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白，可用于測定從線粒體泄漏的 NOX（此步可選做））。留下沉淀（沉淀即為線粒體）。 ③ 在沉淀（線粒體）中加入 200μL 試劑二，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 5s，間隔 3s，重復(fù) 30 次），液體置于冰上用于線粒體 NOX 酶活性測定。【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取，或按照細(xì) 菌/細(xì)胞數(shù)量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 2、上機(jī)檢測： 1 紫外分光光度計預(yù)熱 30min 以上，設(shè)定溫度 25℃，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零。 2 所有試劑解凍至室溫（25℃）。 ③ 在 1mL 石英比色皿中依次加入：試劑名稱（μL）測定管試劑三 640 試劑四 20本試劑盒僅供科研使用 2 試劑五 20 混勻，室溫（25℃）靜置 3min 樣本 60 混勻，室溫（25℃）立即于 340nm 處讀取 A1，5min 后讀取 A2，△A=A1-A2 【注】若△A 的值在零附近，可以延長反應(yīng)時間 T（如至 10min 或更長），則改變后的反應(yīng)時間 T 需代入公式重新計算。五、結(jié)果計算： 1、按樣本蛋白濃度計算：酶活定義：每毫克組織蛋白每分鐘氧化 1 nmol NADH 定義為一個酶活單位。 NOX（nmol/min /mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(V1×Cpr) ÷T=396.6×ΔA÷Cpr 2、按樣本鮮重計算：酶活定義：每克組織每分鐘氧化 1 nmol NADH 定義為一個酶活單位。 NOX（nmol/min /g 鮮重）=[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(W× V1÷V)÷T=79.3×ΔA÷W 3、按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：酶活定義：每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘氧化 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。 NOX（nmol/min /104 cell）=[ΔA÷（ε×d）×V2×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.16×ΔA ε---NADH 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L/mol/cm； d---光徑，1cm； V--- 加入提取液體積， 0.2mL ； V1--- 加入樣本體積， 0.06mL ； V2---反應(yīng)體系總體積，7.4×10-4 L； T---反應(yīng)時間，5min； W---樣本質(zhì)量，g； 500---細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500 萬； Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；建議使用本公司的 BCA 蛋白含量檢測試劑盒。