蝦白斑病毒熒光檢測儀在水產(chǎn)病害檢測儀中,樣品首先要進行提取DNA或RNA等核酸物質(zhì),并進行純化和濃縮。然后,將提取出的核酸樣品放置于PCR反應管中,加入PCR反應體系,包括引物、酶、緩沖液等。引物是PCR反應中的關鍵因素之一,它們可以與目標DNA序列的兩端結(jié)合,從而使PCR酶在引物的作用下特異性地擴增目標DNA序列。PCR反應體系中的其他成分如酶和緩沖液等則可以使PCR反應更加穩(wěn)定和高效。
實時熒光定量PCR系統(tǒng)簡介
蝦白斑病毒熒光檢測儀主要用于運行實時熒光定量PCR實驗,通過熒光激發(fā)和采集的方式,對實驗過程進行實時監(jiān)控,將實驗過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線,實時呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對實驗數(shù)據(jù)進行擬合和分析,最后可生成PDF格式的實驗報告。
對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本(如血液,體液等)中包含的目標核酸,進行快速精準的定性和定量分析,同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M行標準曲線,熔解曲線,基因分型等分析。
基本原理
實時熒光定量PCR儀器的原理:聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA擴增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,是基因擴增技術的一次重大革新。PCR技術可將極微量的目標DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。
實時熒光定量PCR技術是在常規(guī)PCR基礎上加入相應的熒光染料或熒光標記探針,在PCR反應過程中通過熒光信號變化,對整個PCR進程進行實時檢測,以熒光化學物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
實時熒光定量PCR系統(tǒng)應用領域
◆食源性致病菌檢測 ◆動植物源性檢測◆植物科學與農(nóng)業(yè)生物技術◆基因突變及多態(tài)性◆基礎科學研究◆水體監(jiān)測◆病原核酸檢測◆ 轉(zhuǎn)基因檢測◆動物疫情監(jiān)測◆食品衛(wèi)生檢疫◆海關進出口檢疫
儀器基本結(jié)構
實時熒光定量PCR系統(tǒng)是實時檢測反應的儀器,主要由基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機及應用軟件組成。其中兩個核心功能模塊:熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實時檢測系統(tǒng)。其中基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴增儀工作原理基本相同,采用半導體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。
儀器特點:
1、體積小,重量輕,方便攜帶,兼容0.2PCR單管、八聯(lián)管;
2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導體芯片,新一代半導體升降溫技術,最快變溫速率可達每秒7度,使用壽命可達一百萬次循環(huán);
3、采用的采光檢測處理技術,自動調(diào)節(jié)熒光本底,提高熒光信號靈敏度和信噪比,獲得更佳結(jié)果;
4、13S四通道快速采光,熒光采集信號穩(wěn)定,減少延時誤差;
5、采用免維護的長壽命LED光源,無需更換,獨立熒光通道,不同通道之間的串擾更小;
6、 恒流式控制電路,功率輸出平滑,延長 Peltier壽命,提高控溫精度;
7、具有過流、過溫、瞬時斷電數(shù)據(jù)自恢復等保護功能,儀器重啟后繼續(xù)運行未完成實驗,確保實驗安全運行;
8、強大的軟件分析功能,可以進行定量分析,熔解曲線分析,基因分型等,分析軟件升級,支持不同行業(yè)的軟件定制;
9、支持恒溫、熒光定量雙模式,適配市面上多數(shù)的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒;
10、自帶10寸彩色觸摸屏控制,也可以連接電腦控制。
儀器技術指標
“///” 符號表示國家標準目前沒有定義該項指標或者強制性要求。
H160 | H320 | H480 | ||
外觀 | ||||
外形尺寸 | 235mm*385mm*175mm(寬*深*高) | |||
重量 | 5.6kg | 5.7kg | 5.8Kg | |
電氣參數(shù) | ~220V/50Hz,255W | |||
數(shù)據(jù)接口 | USB 2.0 *2(右側(cè)兩個) | |||
環(huán)境參數(shù) | ||||
運行條件 | 溫度:10-30℃,濕度:20%~80% | |||
運輸及貯存條件 | 溫度:-20~55℃,濕度:20%~80% | |||
海拔高度 | <2500米 | |||
噪聲等級 | A計權,<60dB | |||
樣本參數(shù) | ||||
樣本容量 | 16*0.2mL | 32*0.2mL | 48*0.2mL | |
試管類型 | 單管,八聯(lián)排試管 | |||
樣本容積 | 15-100uL | |||
溫度特性 | ||||
加熱/冷卻方式 | 半導體加熱/制冷 | |||
溫度范圍 | 4℃-99℃ | |||
最大升溫速率 | ≥5.5℃/s | |||
平均升溫速率 | ≥3.5℃/s | |||
最大降溫速率 | ≥4.5℃/s | |||
平均降溫速率 | ≥2.5℃/s | |||
控溫精度 | ≤±0.01℃ | |||
溫度準確度 | ≤±0.1℃ | |||
溫度均勻性 | ≤±0.3℃ | |||
光學特性 | ||||
熒光檢測通道數(shù) | 4通道 | |||
發(fā)光器件 | 高亮度LED | |||
采光器件 | 高靈敏度,高信噪比光電二極管 | |||
適配探針或染料 | 第一通道:470/520 FAM,SYBR Green | |||
第二通道:530/570 HEX,JOE,VIC | ||||
第三通道:580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red | ||||
第四通道:630/670 CY5 | ||||
檢測靈敏度 | 1個拷貝 | |||
線性檢測范圍 | 100~1010個拷貝 | |||
線性相關系數(shù) | ≥0.999 | |||
通道交叉串擾 | 無串擾 | |||
檢測重復性 | ≤1.0% |
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