原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

人子宮頸上皮細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

人子宮頸上皮分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體，上端與子宮體相連，下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長(zhǎng)梭性管腔，其上端通過(guò)宮頸內(nèi)口與子宮腔相連，其下端通過(guò)宮頸外口開(kāi)口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問(wèn)題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮頸上皮采用膠原酶消化法，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai mitochondrial aibody (AMA) ELISA Kit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒

Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACA-IgA(Humanai-cardiolipinaibodyIgA)ELISAKit人抗心0脂抗體IgA規(guī)格：48T/96T

液相法去內(nèi)毒素試劑盒20次

Mouseosteonectin,ONELISAKit小鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒 ，英文名： GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit

Neuroophic factor mouse glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒

MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISAKit 小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPeosidineELISAKit人戊糖素規(guī)格：48T/96T

同位素[γ32P]ATP激酶標(biāo)記GST融合蛋白篩選試劑盒10次

ELISAKitx大鼠硫氧化還原蛋白規(guī)格：48T/96T

HA重組甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RNF148(Ring finger protein 148 0.5mgRNF148(Ring finger protein 148) 環(huán)指蛋白148抗原

TNFRSF10D重組人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

人子宮頸上皮細(xì)胞RNF148(Ring finger protein 148 0.5mgRNF148(Ring finger protein 148) 環(huán)指蛋白148抗原

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

TNFRSF10D重組人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。