501高效液相色譜測(cè)定水樣中的
儀器和試劑
1、儀器：
⑴STI501液相色譜儀梯度系統(tǒng)：
①流動(dòng)相：乙腈、MQ水（由鋁箔紙包裹，防止其中產(chǎn)生藻類，堵塞進(jìn)口）
②高壓：并聯(lián)式微體積柱塞往復(fù)泵
型號(hào)：P501
廠家：Science
③色譜柱：固定相填充物：十八碳（C18）
型號(hào)：Vertex C18
參數(shù)： 填充物粒徑：5 μm 內(nèi)徑×長(zhǎng)度：4.6×250 mm
④檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器（UV）
型號(hào)：UV-501 電壓：230-210V
廠家：Science
⑤超聲波清洗裝置： 型號(hào)：SX-01
⑥進(jìn)樣裝置：高壓六通進(jìn)樣閥
兩個(gè)狀態(tài)： Load：樣品進(jìn)入六通閥，未入色譜柱 Inject：位于六通閥的樣品進(jìn)入色譜柱
⑦淋洗液（洗針、洗閥）：甲醇
⑵移液管 2 mL、5 mL各一支
⑶具塞離心管10 mL三支、1.5 mL一次性離心管一支
2. 試劑：甲醇（色譜純）； 標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（10 mg/L）
待測(cè)水樣。
實(shí)驗(yàn)步驟
1 標(biāo)準(zhǔn)系列配制
取標(biāo)準(zhǔn)使用液0.50、1.00、2.00 mL于10 mL的具塞離心管中，用甲醇定容至5 mL，混勻。待測(cè)。
2 樣品的制備
取水樣約1 mL于1.5 mL一次性離心管中。待測(cè)。
3 色譜參數(shù)
色譜柱：C18 柱；
流動(dòng)相：乙腈、水；
梯度洗脫程序：
| 洗脫時(shí)間 | 0:00 | 4:00 | 4:01 | 5:00 | 5:01 | 8:00 |
| 乙腈（%） | 65 | 65 | 75 | 75 | 65 | 65 |
流速：1.0 mL/min；
柱溫：室溫；
進(jìn)樣量：20 μL；
檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm
測(cè)定
測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列，再測(cè)定樣品。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列中的保留時(shí)間，定性確定樣品中的目標(biāo)物。
記錄標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中目標(biāo)物的峰面積。
數(shù)據(jù)記錄與計(jì)算
（1）標(biāo)準(zhǔn)系列c=4mg/mL的譜圖及樣品的譜圖：
樣品譜圖（圖2）中，三個(gè)明顯高的峰的記錄數(shù)據(jù)如下表
表1 樣品的譜圖中三個(gè)峰的特征數(shù)據(jù)
| | 保留時(shí)間（t/min） | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU |
| 個(gè)峰 | 3.892 | 22907 | 2928 |
| 第二個(gè)峰 | 4.307 | 182.47 | |
| 第三個(gè)峰 | 4.879 | 20567 | |
圖1 標(biāo)準(zhǔn)系列c=4mg/mL的譜圖
圖2 樣品的譜圖
2. 標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中的保留時(shí)間、峰面積、峰高等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
表2 標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品中的譜圖峰的特征數(shù)據(jù)
| | 標(biāo)準(zhǔn)樣品體積/mL | 保留時(shí)間t/min | 色譜峰面積/counts | 色譜峰高/mAU | 濃度/(mg/mL) |
| 1 | 0.5 | 3.951 | 17640 | 1209 | 1.0 |
| 2 | 1.0 | 3.837 | 34754 | 2963 | 2.0 |
| 3 | 2.0 | 3.773 | 66625 | 5258 | 4.0 |
| 樣品 | － | 3.892 | 22907 | 2928 | 1.3 |
參考文獻(xiàn)：
關(guān)鍵詞：，高效液相色譜法，501液相色譜儀
