時(shí)光飛逝，轉(zhuǎn)眼間2013年的日歷已經(jīng)翻過(guò)zui后一頁(yè)。在過(guò)去的一年中，基因組編輯、數(shù)字PCR、測(cè)序等新技術(shù)仍在不斷發(fā)展，讓人驚喜；同時(shí)，經(jīng)典技術(shù)，如轉(zhuǎn)染、miRNA分析、蛋白檢測(cè)也仍然受到大家的關(guān)注。以下是2013年度zui受關(guān)注的技術(shù)文章。
PacBio RS第三代單分子測(cè)序系統(tǒng)訪談紀(jì)要（五）
第三代單分子測(cè)序技術(shù)PacBio未來(lái)會(huì)朝著哪個(gè)方向升級(jí)？它將為測(cè)序帶來(lái)哪些變化？生物通收集了眾多聲名赫赫用戶(hù)的看法，為您奉上這一期的訪談紀(jì)要。PacBio公司的管理人員也發(fā)表了他們的看法。
不用膠片也能“壓”出高質(zhì)量的圖片？
新年伊始，美國(guó)LI-COR公司推出了一款個(gè)人型的數(shù)碼化學(xué)發(fā)光成像儀。無(wú)需膠片和暗房也能得到靈敏度近同于壓片的圖片，軟件控制數(shù)碼成像并且直接進(jìn)行蛋白灰度值的分析，優(yōu)勢(shì)的價(jià)格將有望成為生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室新伙伴。
檢測(cè)蛋白磷酸化的六種方法
磷酸化這一關(guān)鍵的翻譯后修飾調(diào)控了廣泛的細(xì)胞活性，包括細(xì)胞周期、分化、代謝和神經(jīng)元通訊。在評(píng)估磷酸化時(shí)，選擇的方法可能會(huì)有所不同，這取決于多個(gè)因素，包括提出的具體問(wèn)題以及特殊儀器或試劑的可用性。如何檢測(cè)蛋白磷酸化，本文簡(jiǎn)要介紹了幾種常用方法，并提出了每種方法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染VS瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
轉(zhuǎn)染是將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程，是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具。轉(zhuǎn)染方法很多可謂條條大路通羅馬，那么究竟是選瞬時(shí)轉(zhuǎn)染好還是選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染好呢？
基因組編輯三大技術(shù)：CRISPR、TALEN和ZFN
zui近出現(xiàn)的新工具讓研究人員能夠在幾乎任何物種中實(shí)現(xiàn)的修飾，有著核苷酸水平的度，也有著令人難以置信的速度。大部分是在特定的位置引入雙鏈DNA斷裂，然后由細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)。區(qū)別在于如何引入斷裂，以及新序列靶定的難易程度。
兩種miRNA定量分析的比較
英國(guó)LGC有限公司的研究人員比較了市場(chǎng)上兩種的microRNA（miRNA）定量PCR分析，Life Technologies的Taqman miRNA Assay和Exiqon的miRCURY LNA Universal RT microRNA PCR assay，并評(píng)估了小RNA富集方法對(duì)qPCR分析的影響。該成果近日發(fā)表在《BioTechniques》雜志上。
Illumina宣布測(cè)序技術(shù)大創(chuàng)新
Illumina公司近日宣布了一系列產(chǎn)品和技術(shù)上的創(chuàng)新，從樣品制備到系統(tǒng)改進(jìn)再到數(shù)據(jù)分析，這有望帶來(lái)基因組研究上的新突破。隨著平臺(tái)的不斷改進(jìn)，測(cè)序速度、準(zhǔn)確性、產(chǎn)量和流程都有望改善。
探索lncRNA的世界 各路工具來(lái)幫忙
探索lncRNA的世界，當(dāng)然需要一定的工具。所幸，lncRNA與mRNA有些相似，故標(biāo)準(zhǔn)的基因表達(dá)分析工具（如cDNA制備、定量PCR、芯片、測(cè)序）也能派上用場(chǎng)。據(jù)專(zhuān)家介紹，*需要注意的就是靈敏度。
dPCR vs. qPCR 我該如何選擇？
數(shù)字PCR（dPCR）是PCR領(lǐng)域的新浪潮。它的與眾不同之處在于樣品分液。通過(guò)微流體芯片、通道或液滴實(shí)現(xiàn)分液，而每個(gè)都作為單獨(dú)的PCR反應(yīng)，帶來(lái)了出色的靈敏度。同時(shí)，也無(wú)需建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。然而，我們究竟應(yīng)不應(yīng)該追趕這個(gè)新浪潮？這在很大程度上取決于你的應(yīng)用和所需的靈敏度水平。何時(shí)應(yīng)該選擇dPCR，讓我們聽(tīng)聽(tīng)專(zhuān)家的意見(jiàn)。
讓我們輕松揭開(kāi)exosome的秘密
exosome是一種直徑約為30-150 nm的小囊泡。它們不僅由所有培養(yǎng)的細(xì)胞所分泌，還天然存在于各種體液中，參與細(xì)胞間通訊，或支持或干擾不同的生理過(guò)程。對(duì)于這一新興的研究熱點(diǎn)，生物通在這里為您推薦一系列全新的標(biāo)準(zhǔn)化研究工具，讓您可以將更多精力專(zhuān)注于exosome通路和生物學(xué)功能的研究上。
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