CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase
英文名稱(chēng):T4 DNA Ligase
CAS號(hào):9015-85-4
級(jí)別:BR
分子量:55.3kDa,單體
來(lái)源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:1u/ul(200CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液:50%(w/v)聚乙二醇4000
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過(guò)200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:聚乙二醇(PEG)可*地增加平末端DNA的連接效率,PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%(w/v);T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè):粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對(duì)單鏈核酸無(wú)酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存: -20°C
CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase 質(zhì)量品牌保證,價(jià)格公正,傾力為國(guó)內(nèi)國(guó)外生命科學(xué)研究人員提供*的產(chǎn)品。咨詢!
CAS:871-84-1,1,7-辛二炔,英文名稱(chēng):1,7-Octadiyne
2--4-硝基苯胺CAS:121-87-9,Chloro-4-nitroanil,密封保存,98%
硫酸鎳,規(guī)格型號(hào):AR500g
人*Ⅱ(FⅡ)Elisa試劑盒現(xiàn)貨,Human coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒,96T/48T
CAS:638-02-8,2,5-二甲基噻吩,純度:99%,規(guī)格:5ml
*價(jià)格,Cholesterol,產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn),規(guī)格:100g
硫酸*,KanamycinSulfate,產(chǎn)地:USB[分],規(guī)格:5g
96T/48T,Hpt/HP,牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Elisa試劑盒Bovine Haptoglobin,Hpt/HP ELISA試劑盒
人schistosoma價(jià)格Elisa試劑盒,96T/48T,humanschistosomaELISA試劑盒
內(nèi)皮素(ET),方法:PR(進(jìn)口原料),標(biāo)準(zhǔn)范圍:,標(biāo)準(zhǔn)范圍:20-1620pg/ml,反應(yīng)溫度及時(shí)間:4℃24小時(shí),加樣量:100μl
CAS:106-52-5,1-甲基-4-醇,純度:98%,規(guī)格:5g
CAS:119-36-8,*,純度:99%,規(guī)格:5ml
190906-92-4|2-甲基-4-氧代-1-羧酸-1,1-二甲基乙酯,產(chǎn)品名稱(chēng):2-甲基-4-氧代-1-羧酸-1,1-二甲基乙酯CasNo.:190906-92-4分子式:C11H19NO3分子量:213.27
E-0071,牛蒡子苷,標(biāo)準(zhǔn)品,Arctiin,≥98%