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MISA試劑盒檢測(cè)樣品組織勻漿液的處理方法:
一、將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
二、將組織塊稱重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分
三、將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中
四、吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
五、尿液、唾液等其他液體生物樣本
MISA試劑盒檢測(cè)樣品血清的處理方法:
1、血清是zui常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本,處理也比較簡單。
2、用無熱原的試管或離心管采集血液標(biāo)本,將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,使血清析出
3、4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細(xì)收集上清,建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
4、采血過程中應(yīng)避免溶血,因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色,而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。
5、同時(shí)也應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測(cè)的假陽性。
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