牛血小板活化因子（PAF）ELISA試劑盒

免費(fèi)代測(cè)ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果

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產(chǎn)品說(shuō)明書，詳細(xì)信息，產(chǎn)品價(jià)格，請(qǐng)。

主營(yíng)產(chǎn)品： ELISA試劑盒，生物試劑，免疫組學(xué)，生物抗體，蛋白組學(xué)，分子生物等。

ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右  （2000-3000轉(zhuǎn)/分）去除顆粒。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清   。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

生化試劑應(yīng)用常見問(wèn)題:

1 試劑空白

1 線性范圍變窄 現(xiàn)象：高值測(cè)不高。原因：生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足；試劑成份穩(wěn)定性較差。1．2 靈敏度變低現(xiàn)象：酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降，測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因：試劑底物濃度不足。1．3 低值偏高 現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線（吸光度VS時(shí)間）明顯波動(dòng)。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導(dǎo)致干擾作用。

2 樣品信息

樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此，應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的檢測(cè)模式，并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響，減少干擾程度。

3 測(cè)定范圍

每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過(guò)此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過(guò)范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。

4 底物耗盡

使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí)，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，吸光度上升或下降會(huì)超過(guò)某一吸光度變化范圍，監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性，使測(cè)定結(jié)果不可靠。

5 酶的預(yù)活化

測(cè)定血清中的某些酶，如CK，離體（采血）后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通過(guò)適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半*。實(shí)驗(yàn)研究證明，NAC對(duì)血清中已失活的CK活化過(guò)程約需180 S。這就是CK測(cè)定為什么要延遲時(shí)間較長(zhǎng)的理論依據(jù)。在AST，ALT采用IFCC*方法測(cè)定時(shí)需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào)：含有活化劑的生化試劑，其測(cè)定酶活性的結(jié)果要高些。了解更多詳細(xì)信息

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