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雙抗體夾心法測定抗原

將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面;

加抗原，形成抗原-抗體復(fù)合物;

加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復(fù)合物;

加酶標(biāo)抗抗體（第二種動物抗體的抗體）;

加底物。底物的降解量＝抗原量。

ELISA的基本原理有三條：
    （1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
    （2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
    （3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果