北京RNeasy Plus Micro Kit (50)價(jià)格，qiagen74034現(xiàn)貨 
性能
RNeasy Plus Micro操作流程整合了RNeasy技術(shù)，可選擇性去除雙鏈DNA。去除基因組DNA后，使用RNeasy MinElute離心柱純化得到高品質(zhì)RNA。由此確保可重復(fù)獲得高產(chǎn)量RNA，并高效去除基因組DNA污染，用于敏感的下游應(yīng)用（參見(jiàn)High, reproducible RNA yields）。通常從組織和培養(yǎng)細(xì)胞中可獲得Agilent RIN值接近10的總RNA。

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原理
細(xì)胞和易裂解組織首先在含有異硫氰酸胍的高變性Buffer RLT Plus中裂解和勻質(zhì)化，能使RNases立即失活，以保證分離到完整的RNA。裂解液再流過(guò)gDNA Eliminator柱。該離心柱與高鹽緩沖液共同作用，可選擇性高效的去除基因組DNA。加入乙醇以提供RNA結(jié)合的合適條件，樣本再加入到RNeasy MinElute離心柱。含有硅膠膜的特制離心柱能特異性的結(jié)合裂解細(xì)胞中的RNA。
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操作流程
RNeasy Plus Micro Kit能從多達(dá)5 x 105個(gè)細(xì)胞或5 mg組織中純化總RNA，非常適于小樣本抽提。簡(jiǎn)潔的工作流程可在30分鐘內(nèi)純化得到已去除基因組DNA的RNA（參見(jiàn)RNeasy Plus procedure ）。樣本首先被裂解和勻質(zhì)化。裂解液流過(guò)gDNA Eliminator柱，在流過(guò)gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇，樣本再上樣到RNeasy MinElute離心柱。RNA結(jié)合到膜上，污染物被洗去。獲得高品質(zhì)RNA，洗脫體積14 µl。

處理不同的起始樣本可用不同的實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質(zhì)化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類(lèi)似。此操作流程適合富集mRNA，不包括大部分小于200 nt的RNAs（如rRNAs和tRNAs）。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可從培養(yǎng)細(xì)胞中純化含miRNA等小RNAs的總RNA。

使用Buffer RLT Plus（RNeasy Plus Micro Kit提供）進(jìn)行組織破碎和勻質(zhì)化時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生過(guò)多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX（單獨(dú)提供）可充分減少泡沫產(chǎn)生。Reagent DX經(jīng)仔細(xì)檢測(cè)，表明配合此試劑盒使用不會(huì)影響RNA的純度或下游應(yīng)用。

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應(yīng)用
RNeasy Plus Micro Kit純化得到的RNA適合對(duì)少量DNA污染敏感的下游應(yīng)用，如定量real-time RT-PCR。純化得到的RNA還可用于其他應(yīng)用。
RNeasy Plus Micro Kit適用于小樣本，包括：
激光顯微切割冰凍切片 細(xì)針穿刺