小鼠載脂蛋白A1（apo-A1）ELISA試劑盒基因工程試劑對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響
     免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)質(zhì)的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
小鼠載脂蛋白A1（apo-A1）ELISA試劑盒HBsAg試劑特點(diǎn)（檢測(cè)模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位，可測(cè)得HBsAg變異樣品，提高檢測(cè)的特異性（99.98%）提高檢測(cè)的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(shuō)（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
方法一　雙抗體夾心法
　　1.　包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
　　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
　　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
　　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
　　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
HUVEC（人臍靜脈血管內(nèi)皮）  CXC趨化因子受體1（CXCR1） 心肌特異性肌鈣蛋白T（cTnT）
A10（大鼠主動(dòng)脈血管平滑?。?nbsp; XC趨化因子受體1（XCR1） 肌球蛋白重鏈（MHC）
3T3-L1（小鼠脂肪）  二級(jí)淋巴組織趨化因子（SLC/CCL21） 熱休克蛋白27（HSP-27）
A9（皮下結(jié)締組織）  E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白（E-Cad） 血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白（ANG）
WEHI 22.1（B淋巴 ）  腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF） 心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）
NIH/3T3（胚胎成纖維）  白活化黏附因子（ALCAM） 血管舒緩激肽（BK）
MC3T3-E1 Subclone 14（小鼠原成骨）  活化素A（ACV-A） 肌球蛋白輕鏈（MLC）
L6（大鼠成肌 ）  神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1（NRG-1） α-輔肌動(dòng)蛋白3（ACTN-3）
H9c2（2-1）（大鼠心?。?nbsp; 心鈉肽（ANP） 超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）
RSC96（大鼠雪旺）  多巴胺D2受體（D2R） 肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）
CHO/dhFr-（中國(guó)倉(cāng)鼠二氫*還原酶缺陷）  內(nèi)*肽-2（EM-2） 血清淀粉樣蛋白A（SAA）
Lec1（卵巢）  α-內(nèi)*肽（α-EP） 熱休克蛋白60（Hsp-60）
293T/17 [HEK 293T/17] （人胚腎）  抑制素（INH） 熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）
AAV-293（ 胚腎 ）  神經(jīng)元凋亡抑制蛋白（NAIP） 心肌營(yíng)養(yǎng)素1（CT-1）
hFOB 1.19（SV40 轉(zhuǎn)染成骨）  食欲素/阿立新B（OX-B） 銅藍(lán)蛋白（CP/CER）
Elisa的發(fā)展