U-2 OS骨肉瘤細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）U-2 OS骨肉瘤細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
2-（2-HYDROXY-ETHYL）-PIPERIDINE-1-CARBOXYLIC ACID TERT-BUTYL ESTER N-叔丁氧羰基-2-哌啶-2-基乙醇 118811-03-3
2-（2-Methoxyethoxy）acetic acid 2-（2-甲氧基乙氧基）乙酸 16024-56-9
2-（2-Methoxyethoxy）ethanaMine 1-（2-氨基乙氧基）-2-甲氧基乙烷 31576-51-9
METHYLDIGLYCOL 二乙二醇單甲醚 111-77-3
2-（2-Methoxyphenoxy）ethylaMine 2-甲氧基苯氧基乙胺 1836-62-0
2-（nitroiMino）iMidazolidine 2-硝基亞氨基咪唑烷 5465-96-3
1H-Pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-aMine 1H-吡唑并[3,4-B]吡啶-4-胺 49834-62-0
1H-PYRAZOLO[3,4-C]PYRIDINE 1H-吡唑并[3,4-C]吡啶 271-47-6
1H-Pyrazolo[4,3-c]pyridine, 4,5,6,7-tetrahydro-1-Methyl-3-（trifluoroMethyl）- 4,5,6,7-四氫-1-甲基-3-（三氟甲基）吡唑啉酮-[4,3-C]-吡啶 794451-94-8
1-Methoxy-5-MethylphenaziniuM Methyl sulfate 1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯鹽 65162-13-2
1-METHOXYDECANE 甲癸醚 7289-52-3
1-Methoxypiperidin-4-one 1-甲氧基哌啶-4-酮 102170-24-1
1-Methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline 1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉 4965/9/7
1-Methyl-1,3-dihydro-iMidazol-2-one  39799-77-4
3-PyridinecarboxaMide,1,4-dihydro-1-Methyl-（9CI）  17750-23-1
1-METHYLCYCLOPROPANAMINE HYDROCHLORIDE 1-甲基環(huán)丙胺 22936-83-0
1-Methyl-1H-indazole-4-carbaldehyde  1053655-56-3
5-AMi-Methylpyrazole 1-甲基-5-氨基吡唑 1192-21-8
1-METHYL-2-IMIDAZOLIDINONE 1-甲基-2-咪唑啉酮 694-32-6
1-Methyl-2-nitro-6-phenyliMidazo[4,5-B]pyridine  129018-59-3
1-Methyl-2-phenyl-1H-iMidazole  3475/7/8
N-NITROSO-N-METHYL-N'-NITROGUANIDINE 1-甲基-3-硝基-1-亞硝基胍 70-25-7
1-Methyl-4-（1-Methyleneallyl）cyclohexene  19957-85-8
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。