Bcap-37乳腺癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）Bcap-37乳腺癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1-（2-nitrophenyl）ethanol 1-（2-硝基苯基）乙醇 3205-25-2
1-（2-PIPERIDINOETHYL）PIPERAZINE 1-（2-哌啶乙基）哌嗪 22763-65-1
1-（4-FLUOROPHENYL）VINYLBORONIC ACID, PINACOL ESTER 1-（4-氟苯基）乙烯基硼酸頻哪醇酯 850567-55-4
1-（4-IODO-2,5-DIMETHOXYPHENYL）PROPAN-2-AMINE  64584-34-5
1-（4-ISOCYANATOPHENYL）PIPERIDINE  879896-41-0
1-（4-Mercaptophenyl）ethanone  3814-20-8
1-（4-Methoxyphenyl）-1,3,8-triazaspiro[4.5]decan-4-one  1027-69-6
1-（4-METHOXYPHENYL）BUTANE-1,3-DIONE 1-（對(duì)甲氧基苯基）-1,3-丁二酮 4023-80-7
1-（4-METHYLBENZYL）PIPERAZINE 1-（4-甲基苯基）哌嗪 23173-57-1
1-（4-Methylphenyl）-1,3,8-triazaspiro[4.5]decan-4-one  1023-87-6
1-（4-TERT-BUTYLBENZYL）PIPERAZINE 1-（4-叔丁基芐基）哌嗪 956-61-6
1-（5-BROMO-2-FURYL）ETHANONE 4 -氨基- N,N -二甲基苯磺 3199-50-6
1-（5-BroMopyriMidin-2-yl）piperidine-4-carboxylic acid  149506-04-7
1-（5-hydroxy-2-nitrophenyl）ethanone 2-硝基-5-羥基苯乙酮 30879-49-3
FRESELESTAT  208848-19-5
1-（allyloxy）-2,2-bis[（allyloxy）Methyl]butane  682-08-6
1-（AMinoMethyl）-cyclopropanol 1-氨甲基-1-環(huán)丙醇 74592-33-9
1-（Benzyloxy）-3-broMo-5-（trifluoroMethoxy）benzene 1-（BENZYLOXY）-3-BROMO-5-（TRIFLUOROMETHOXY）BENZENE 1221658-68-9
o-Methoxybenzyl broMide 2-甲氧基溴芐 52289-93-7
10g 4-硝基-2-三氟甲基溴芐 694499-22-4
1-（2-NAPHTHYL）METHANAMINE 1-（2-萘基）甲胺 2018-90-8
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。