NIH:OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)NIH:OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞:
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
(7)流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品:
(R)-1H-3-BENZAZEPINE,8-CHLORO-2,3,4,5-TETRAHYDRO-1-METHYL-,HYDROCHLORIDE 綠卡色林鹽酸鹽 846589-98-8
(R)-1-Methyl hydrogen 3-Methylglutarate (R)-(+)-3-甲基戊二酸甲酯 63473-60-9
(R)-1-N-BOC-3-METHYLAMINO PIPERIDINE (R)-1-N-BOC-3-甲氨基哌啶 203941-94-0
(R)-2-((R)-6,7-diMethoxy-1-(4-(trifluoroMethyl)phenethyl)-3,4-dihydroisoquinolin-2(1H)-yl)-N-Methyl-2-phenylacetaMide 阿莫倫特 871224-64-5
(R)-2-(AMinoethyl)-1-N-Boc-pyrrolidine (R)-2-氨甲基-1-N-叔丁氧羰基吡咯烷 550378-07-9
(Ra)-1,1'-spirobiindane-7,7'-diol 223259-62-9
(R)-2,2-DIMETHYL-OXAZOLIDINE-3,4-DICARBOXYLIC ACID 3-TERT-BUTYL ESTER 660852-86-8
(R)-2,3-Dihydro-1H-inden-1-aMine hydrochloride (R)-(-)-1-氨基茚鹽酸鹽 10305-73-4
(R)-2,5-Dihydro-3,6-diMethoxy-2-isopropylpyrazine (R)-2,5-二氫-3,6-二甲氧基-2-異丙基吡嗪 109838-85-9
ALR-3456 , MK-0731 (2S)-4-(2,5-二氟苯基)-N-[(3R,4S)-3-氟-1-甲基-4-哌啶基]-2,5-二氫-2-羥基甲基-N-甲基-2-苯基-1H-吡咯-1-羧胺 845256-65-7
(R)-2-AMINOHEX-5-YNOIC ACID 211054-02-3
(R)-2-Benzylbutanedioic acid 4-tert-butyl ester (R)-2-芐基-4-叔丁氧基-4-氧代丁酸 122225-33-6
(R)-2-CARBOXYMETHYL-PIPERIDINE-1-CARBOXYLIC ACID TERT-BUTYL ESTER (R)-1-BOC-2-哌啶乙酸 351410-32-7
(R)-2-ForMyl-1-piperidinecarboxylic acid tert-butyl ester (R)-2-甲?;?1-哌啶羧酸-1,1-二甲基乙酯 (S)- 134526-69-5
(R)-2-HydroxyMethylpropanoic acid (R)-2-羥甲基丙酸 1910-47-0
(R)-2-Methyl-1-boc-piperazine (R)-1-N-Boc-2-甲基哌嗪 170033-47-3
(R)-2-Methyl-Morpholine (R)-2-甲基*啉 168038-14-0
(R)-2-Methylpyrrolidine hydrochloride (R)-2-甲基吡咯烷鹽酸鹽 135324-85-5
(R)-3-(Acetylthio)isobutyryl Chloride 3-乙酰硫基-2-甲基丙酰氯 74345-73-6
(R)-3-(Boc-AMino)piperidine (R)-3-Boc-氨基哌啶 309956-78-3
(R)-3-AMino-4-(pentafluoro-phenyl)-butyric acid-HCl (R)-3-氨基-4-(五氟苯基)丁酸 269398-92-7
(R)-3-AMino-Hexahydro-1H-Azepin (R)-3-氨基-六氫-1H-氮雜環(huán)庚烷 124932-43-0
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