HO-8910PM高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)HO-8910PM高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞:
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品:
(S)-(+)-HEXAHYDROMANDELIC ACID (S)-(+)-六氫扁桃酸 61475-31-8
(S)-(+)-N-BOC-3-N-FMOC-AMINOPYRROLIDINE& (S)-N-BOC-3-N-FMOC-氨基吡咯烷 307531-88-0
(S)-(+)-Pantolactone S-泛解酸內(nèi)酯 5405-40-3
(S)-(1-benzylpyrrolidin-3-yl)MethanaMine (3S)-3-氨甲基-1-芐基吡咯烷 229323-07-3
(S)-1-(TERT-BUTOXYCARBONYL)-2-AZETIDINEMETHANOL (S)-1-BOC-2-氮雜環(huán)丁烷甲醇 161511-85-9
(S)-1-(tert-butoxycarbonyl)azetidine-2-carboxylic acid 1-Boc-L-吖啶-2-羧酸 51077-14-6
(S)-1,1,1-trifluoropropan-2-aMine 125278-10-6
(S)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-Dicarboxylic Acid 1,1'-聯(lián)萘-2,2'-二甲酸 18531-96-9
(R)-1-N-Boc-piperazine-2-carboxylic acid Methyl ester (R)-1-Boc-2-哌嗪甲酸甲酯 252990-05-9
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
(3R,4R)-3-ethyl-4-[(3-MethyliMidazol-4-yl)Methyl]oxolan-2-one 531-35-1
(3R,4R)-pyrrolidine-3,4-diol 186393-31-7
PAROXETINE RELATED COMPOUND C *相關(guān)物質(zhì)C 130855-30-0
(3R,4S)-3-Hydroxy-4-phenyl-2-azetidinone (3R,4S)-3-羥基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮 132127-34-5
(3S)-(+)-3-AMinopyrrolidine dihydrochloride (S)-3-氨基吡咯烷二鹽酸鹽 116183-83-6
(3S)-2,2-diMethyl-1,4-thiazinane-3-carboxylic acid 84915-43-5
(3S)-2-AZABICYCLO(2.2.1)HEPTANE-3-CARBO 171754-02-2
(S)-tert-butyl 3-forMylpyrrolidine-1-carboxylate (3S)-3-甲?;?1-吡咯烷甲酸叔丁酯 191348-04-6
(3S)-3-Methyl-D-aspartic acid (2S,3R)-2-氨基-3-甲基丁二酸 121570-10-3
(3S,3aS,5R)-3,8-diMethyl-5-prop-1-en-2-yl-1,2,3,3a,4,5,6,7-octahydroazulene 3691-11-0
3S,4E)-3-Hydroxy-7-[(triphenylMethyl)thio]-4-heptenoic (3S,4E)-3-羥基-7-[(三苯基甲基)硫基]-4-庚烯酸 180973-24-4
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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