LLC Lewis肺癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）LLC Lewis肺癌細(xì)胞 ：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。 加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
（1S, 2R）-2-（BenzyloxyMethyl）-1-hydroxy-3-cyclopentene *中間體-7 110567-21-0
（1S,2R）-2-（tert-butoxycarbonylaMino）cyclopentanecarboxylic acid （1S,2R）-2-（BOC-氨基）環(huán)戊烷甲酸 137170-89-9
（1S,2R,3S,5R）-2-（BenzyloxyMethyl）-6-oxabicyclo[3.1.0]hexan-3-ol （1S,2R,3S,5R）-2-[（芐氧甲基）-6-氧雜二環(huán)[3.1.0]己-3-醇 117641-39-1
（1S,2R,3S,5R）-3-（PhenylMethoxy）-2-[（phenylMethoxy）Methyl]-6-oxabicyclo[3.1.0]hexane （1S,2R,3S,5R）-3-（芐氧甲基）-6-氧雜二環(huán)[3.1.0]己烷 110567-22-1
（1S,2S）-（+）-2-AMi-phenyl-1,3-propanediol （1S,2S）-（+）-2-氨基-1-苯基-1,3-丙二醇 28143-91-1
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
Magnesium stearate * 557-04-0
MALONDIALDEHYDE 1-[5-（2-羥基乙基）硫代]-4-硝基-2-噻吩]乙基-1-酮 5578-67-6
decahydro-2-hydroxy-2,5,5,8a-tetramethylnaphthalene-1-ethanol 香紫蘇二醇 55881-96-4
5-METHYL-2,2'-BIPYRIDYL 5-甲基-2,2'-聯(lián)吡啶 56100-20-0
BROMONITROMETHANE 溴代硝基甲烷 563-70-2
Iron（II） carbonate 碳酸亞鐵（1:1） 563-71-3
2-OXOETHANOIC ACID 乙醛酸水合物 563-96-2
AKOS BB-9698 5,6-二氫環(huán)戊并[B]噻吩-4-酮 5650-51-1
7-Keto DHEA 7-酮基去氫表雄酮 566-19-8
2,2-DIMETHYL-BUT-3-YNOIC ACID 2,2-二甲基-丁-3-炔酸 56663-76-4
CATIONIC STARCH 2-羥基-3-（*基氨根）丙基醚淀粉氯化物 56780-58-6
ethyl L-isoleucinate hydrochloride L-異*乙酯鹽酸鹽 56782-52-6
PolyhexaMethyleneguanidine hydrochloride 聚六亞甲基胍鹽酸鹽 57028-96-3
Tetraphenyl resorcinol bis（diphenylphosphate） *四苯基二磷酸酯 57583-54-7
Sulfamethazine * 57-68-1
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。