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SK-N-SH神經母細胞瘤細胞

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所在地上海市

更新時間:2017-04-02 12:57:08瀏覽次數(shù):211次

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SK-N-SH神經母細胞瘤細胞ATCC株?詢價

SK-N-SH神經母細胞瘤細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標準胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體(FITC標記抗體)SK-N-SH神經母細胞瘤細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產品:
Octanedioic acid,1,8-diethyl esterDiethyl suberate 辛二酸二乙酯 2050-23-9
Triton X-100 聚乙二醇單辛基苯基醚 9002-93-1
Octreotide acetate * 83150-76-9
Octyl 5-N,N-diethylaMino-2-phenylsulfonyl-2,4-pentadienoate 5-N,N-二乙基氨基-2-苯基磺?;?2,4-戊二烯酸辛酯 98835-90-6
octyl nitrite  629-46-9
OCTYLTRICHLOROTIN 乙辛基三氯化錫 3091-25-6
O-DesMethyltraMadol  73986-53-5
O-DESMETHYL MEBEVERINE ACID  586357-02-2
O-DesMethyl TraMadol Hydrochloride  185453-02-5
o-desMethylvenlaine O-去甲* 93413-62-8
Oh*  78995-14-9
Olanzapine glucuronide  186792-80-3
Olaparib 奧拉帕尼 763113-22-0
OleaMide 油酸酰胺 301-02-0
英文名稱 中文名稱 CAS號
N4-Benzoyl-5-fluorocytosine  10357-07-0
N4-Benzoyl-5'-O-DMT-2'-O-Methyl-5-Methylcytidine 3'-CE phosphoraMidite  251647-54-8
N4-Benzoyl-5'-O-DMT-2'-O-Methylcytidine 3'-CE phosphoraMidite  163759-94-2
N4-Benzoylcytosine N4-苯甲?;奏?nbsp;26661-13-2
N744 TOSYLATE  72616-22-9
Propanoicacid, 2-[[(ethylthio)thioxoMethyl]thio]-2-Methyl- 2-(乙?guī)€基硫代甲酰硫基)-2-甲基丙酸 881037-62-3
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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