MC3T3-E1 Subclone 14小鼠原成骨細胞 上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清，ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標準胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標記抗體（FITC標記抗體）MC3T3-E1 Subclone 14小鼠原成骨細胞：
（1） 收集1×106個細胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體（5×105個細胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法：
（1）收集2×106個細胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標記（FITC）標記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞；固定待測。
（7）流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時。
（3）調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升，取1毫升細胞懸液，用PBS洗三次，細胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
METHYL6-CHLOROOXOINDOLINE-3-CARBOXYLATE  151056-78-9
MethylaluMinuM dichloride 甲基二氯化鋁 917-65-7
MethylcarbaMoyl chloride 甲胺基甲酰氯 6452-47-7
Methylcyclopropane  594-11-6
METHYL-D3 ACETATE  24704-57-2
POTASSIUM PEROXYDIPHOSPHATE 過氧焦磷酸鉀 15593-49-4
Methyldichloroarsine. 二氯[化]甲胂 593-89-5
METHYLENECYCLOPROPANE  6142-73-0
N-MethylglucaMine antiMoniate *銻酸鹽 133-51-7
MonoMethylhydrazine 60-34-4
MethyllithiuM in ether 1.6M 甲基鋰 917-54-4
METHYLLITHIUM LITHIUM BROMIDE COMPLEX 甲基鋰-溴化鋰絡(luò)合物,6%在ym中 332360-06-2
Methylparaben 尼泊金甲酯 99-76-3
Methylphosphinic acid the sMallest packing size X 1  4206-94-4
MethylsulfaMoyl chloride 甲基磺酰胺基 氯 10438-96-7
MethylsulfonylMethanaMine  385369-67-5
Methylthio octane 正辛基甲基硫醚 3698-95-1
METHYLTHYMOL BLUE, PENTASODIUM SALT, PURE, 96 甲基百里酚藍 4310-80-9
METHYLTRIFLUOROSILANE  373-74-0
MethyltriMethoxysilane 甲基*氧基硅烷 1185-55-3
Methyltris（MethylethylketoxiMe）silane 甲基三丁酮肟基硅烷 22984-54-9
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。