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CHO/dhFr-中國(guó)倉(cāng)鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-07-03 15:59:35瀏覽次數(shù):414次

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CHO/dhFr-中國(guó)倉(cāng)鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體CHO/dhFr-中國(guó)倉(cāng)鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
Mycophenolate Mofetil * 115007-34-6
Mycophenolate Mofetil * 128794-94-5
Phytic acid dodecasodiuM salt hydrate 植酸十二鈉鹽 123408-98-0
Myriocin 2S,3R,4R,6E-2-氨基-3,4-二羥基-2-羥甲基L-14-氧-6-二十烯酸 35891-70-4
Mupirocin (GMP) * 12650-69-0
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
MESO-TETRAPHENYL-TETRABENZOPORPHINE  119654-64-7
Metacozine * 3734-52-9
Metacycline 甲烯* 914-00-1
MetaMfepraMone 甲胺苯丙酮 15351-09-4
Metanephrine DL-3-甲氧基腎上腺素鹽酸鹽 881-95-8
MET-DIRUX  216064-20-9
MetetoMidine Hydrochloride 鹽酸美托咪啶 106807-72-1
MetforMin 甲福明 657-24-9
MethacrylaMide 甲基丙烯酰胺 79-39-0
Methacrylic anhydride 2-甲基丙烯酸酐 760-93-0
Methacrylonitrile 126-98-7
MethaM sodiuM  137-42-8
Methane sulfonic acid 甲基磺酸 75-75-2
Methane-13C-d3,iodo- (8CI,9CI)  20710-47-8
METHANESELENINIC ACID 甲亞【酉+西】酸 28274-57-9
Methanesulfonyl Chloride  124-63-0
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

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