人肺成纖維細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始人肺成纖維細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
y-E11686 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒
xy-E11687 小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
xy-E11688 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒
xy-E11689 小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒
xy-E11690 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒
xy-E11691 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒
xy-E11692 小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒
xy-E11693 小鼠鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒
xy-E11694 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
xy-E11695 小鼠氧化型*(GSGS)ELISA試劑盒
xy-E11696 小鼠還原型*(GSH)ELISA試劑盒
xy-E11697 小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒
xy-E11698 小鼠c-fos ELISA試劑盒
xy-E11699 小鼠c-jun ELISA試劑盒
xy-E11700 小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒