核酸蛋白儀的基本原理如同一個(gè)分光光度計(jì)，只是只有紫外部分而已，而且大多數(shù)波長(zhǎng)為單波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)（如220nm，254nm,280nm）。用途與液相色譜中的UV檢測(cè)器差不多。
該儀器主要用于核酸或蛋白質(zhì)柱層析中在線檢測(cè)核酸和蛋白質(zhì)，只是定性檢測(cè)，如果配備較好的數(shù)據(jù)工作站亦可定量檢測(cè)。因?yàn)楹怂岷偷鞍自谧贤獠糠钟休^強(qiáng)吸收，而其它的鹽類沒(méi)有。這樣就可以檢測(cè)出你的柱層析過(guò)程流出了幾個(gè)峰，減少手動(dòng)操作時(shí)的誤差。
核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀是檢測(cè)核酸蛋白質(zhì)的重要工具。以下是說(shuō)明書的內(nèi)容。
檢 測(cè) 儀 使 用 說(shuō) 明 書
一．概述
核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀是液湘色譜儀中的一種紫外檢測(cè)裝置，核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀是根據(jù)生命科學(xué)的發(fā)展對(duì)于現(xiàn)代色譜儀器的要求而改進(jìn)設(shè)計(jì)的一種新型紫外檢測(cè)儀。該儀器在創(chuàng)新方面的主要特點(diǎn)為：
1. 該儀器除可搭配蠕動(dòng)泵、自動(dòng)部分收集器、層析柱和色譜數(shù)據(jù)工作站，組成一套完整的液相色譜系列裝置。
2. 該儀器的數(shù)字顯示設(shè)計(jì)為固定光吸收，A顯示計(jì)算機(jī)用和可變量程光吸收Ａ顯示記錄儀用兩種可選模式，這樣可方便于規(guī)范化讀數(shù)（特別是可應(yīng)用于藥品生產(chǎn)的GMP工藝規(guī)范化管理），同時(shí)亦可根據(jù)科研需要進(jìn)行可變量程的高靈敏度讀數(shù)，這樣可方便于對(duì)低濃度樣品檢測(cè)。
3. 該儀器采用新型進(jìn)口R212電倍增管和改進(jìn)型電路結(jié)構(gòu)，使儀器工作更為穩(wěn)定可靠。
該儀器配有上層析柱、恒流泵、部分收集器等等，即組成一套完整的液色湘色譜分離分析系統(tǒng)。它可應(yīng)用于現(xiàn)代生物學(xué)研究，藥物測(cè)定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品及醫(yī)療單位對(duì)具有紫外吸收的樣品作定量分析。本儀器主要元器件均采用進(jìn)口，儀器全部采用LED數(shù)字顯示，使用方便。
三．工作原理
從光源發(fā)出的光經(jīng)狹縫，濾色器聚焦到樣品池上，此單色光通過(guò)樣品池射到光電倍增管的光陰極面上，使光束由于樣品濃度不同所引起透光強(qiáng)度的變化轉(zhuǎn)換成光電流變化，此光電流經(jīng)放大器放大，并輸入到對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器、使透光率Ｔ轉(zhuǎn)換成光吸收Ａ輸出即Ａ=lgＴ/1=ε•ＣＬ式中ε為待測(cè)樣品的摩爾消光系數(shù)，Ｃ為樣品濃度，采用摩爾/升單位，Ｌ為光程，用厘米作單位。根據(jù)上式只要測(cè)出了Ａ、Ｌ和ε就可求出樣品濃度Ｃ。若從放大器直接輸入數(shù)據(jù)工作站，則顯示出的是樣品透光率Ｔ變化的圖譜，若從對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到數(shù)據(jù)工作站上，則顯示的是樣品光吸收變化的圖譜。
四．儀器結(jié)構(gòu)
核酸蛋白檢測(cè)儀、紫外檢測(cè)儀是單光路結(jié)構(gòu)，由紫外檢測(cè)器、和數(shù)據(jù)工作站組成，其構(gòu)造分別說(shuō)明如下：
１．紫外檢測(cè)儀：
它由光源、干涉濾色片、樣品池、光電倍增管、放大和對(duì)數(shù)板、低壓板和高壓板等組成。面板上有四氟塑料管的進(jìn)樣口和出樣口，Ａ調(diào)零以及調(diào)節(jié)“光量”大小旋（光量大小以箭頭表示）。還有光源指示燈、以及量程轉(zhuǎn)換旋鈕。
光源經(jīng)220nm、254nm、280nm、340nm等干涉濾色片提供單色光作為檢測(cè)核酸、蛋白、酶、多肽的光源。
五．記錄儀
根據(jù)用戶簽訂合同而定，目前我廠配有LM17-Ａ型臺(tái)式記錄儀、XWD-100長(zhǎng)形記錄儀、LM14-104臺(tái)式記錄儀。3057-11型日本進(jìn)口記錄儀。使用時(shí)仔細(xì)參閱隨機(jī)說(shuō)明書。
配我廠儀器的記錄儀有以下幾個(gè)要求：
１. 量程一定用10ｍV。
２. 走紙速度為每小時(shí)3cm、6cm或12cm（可自選）
六．使用說(shuō)明和操作步驟
１．在儀器使用前，首先檢查檢測(cè)器和數(shù)據(jù)工作站信號(hào)線正負(fù)是否正確，然后把檢測(cè)器電源插頭和記錄儀電源插頭插入220ｖ電源插座上。
２．波長(zhǎng)旋鈕旋到所需波長(zhǎng)刻度上，把量程旋鈕撥到100％Ｔ檔。
３．按下電源箱面板上的電源開關(guān)，數(shù)秒后指示燈亮。儀器進(jìn)入工作狀態(tài)，此時(shí)記錄指針從零點(diǎn)開始向右移動(dòng)某一刻度，調(diào)節(jié)“光量”旋鈕使指針停留在記錄儀大約中間位置5ｍV左右數(shù)字顯示為約50左右，一般由用戶掌握，儀器開機(jī)穩(wěn)定時(shí)間大約在1小時(shí)以上，待基數(shù)線平直后，可加樣測(cè)試。
４．接通記錄儀電源開關(guān)，指示燈亮，可根據(jù)記錄儀說(shuō)明書調(diào)換不同的紙速度，用戶根據(jù)需要自行掌握，記錄儀量程為10ｍV。
５. 把檢測(cè)器進(jìn)樣口塑料管接到恒流泵上，使層析柱中的洗脫液通過(guò)。透光率為“ｏ”時(shí)，廠家已調(diào)好，光密度Ａ要調(diào)零，量程開關(guān)撥到100％Ｔ調(diào)節(jié)光量旋鈕，使記錄儀指針在10ｍV數(shù)字顯示為100，即透光率為100％。把量程開關(guān)撥到“0.0”檔，緩慢調(diào)節(jié)Ａ調(diào)零旋鈕，使記錄儀指示在“0”位，數(shù)字顯示為“0”。
６．上述5個(gè)步驟結(jié)束后，就可以在層析柱上加樣。當(dāng)樣品經(jīng)層析柱分離，通過(guò)檢測(cè)后就能在記錄儀上繪出所需樣口吸收的圖譜。
７．測(cè)試完畢，必須切斷電源，并用蒸餾水清洗樣品池和四氟管。
注１：記錄儀光吸收Ａ讀數(shù)
當(dāng)采用10ｍV量程記錄儀時(shí)，記錄儀的滿量程讀數(shù)對(duì)應(yīng)于Ａ量程開關(guān)所對(duì)應(yīng)的Ａ讀數(shù)范圍。如Ａ量程開關(guān)選定在0～0.時(shí)，則記錄儀滿量程光吸收Ａ讀數(shù)為0.5，當(dāng)記錄筆指示在記錄紙一半（50％刻度）位置時(shí)即為0.2。
注２：數(shù)字顯示光吸收Ａ讀數(shù)（記錄儀可變量程讀數(shù)模式）
當(dāng)Ａ量程開關(guān)選定在0～1.0Ａ檔時(shí)，此時(shí)數(shù)顯板上顯示和讀數(shù)即為光吸收Ａ的實(shí)際讀數(shù)，如顯示為080即表示為0.80Ａ。
當(dāng)Ａ量程開關(guān)切換在其它量程位置時(shí)，則數(shù)顯光吸收Ａ讀數(shù)為：
Ａ量程選定在0～2.0檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×２＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ
Ａ量程選定在0～1.0檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×１＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ（即直接讀數(shù)）
?。亮砍踢x定在0～0.5檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×１/２＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ
?。亮砍踢x定在0～0.2檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×１/５＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ
Ａ量程選定在0～0.1檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×１/１０＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ
Ａ量程選定在0～0.05檔時(shí)，數(shù)顯讀數(shù)×１/２０＝實(shí)際光吸收讀數(shù)Ａ
注３：數(shù)字顯示光吸收Ａ讀數(shù)（計(jì)算機(jī)固定量程讀數(shù)模式）：
當(dāng)量程開關(guān)選定計(jì)算機(jī)量程模式時(shí)，數(shù)字顯示板的讀數(shù)為實(shí)際光吸收Ａ讀數(shù)。如量程開關(guān)置100％Ｔ檔，調(diào)光量使數(shù)字顯示為50時(shí)，將量程開置計(jì)算機(jī)檔，此時(shí)，數(shù)字顯示板上的讀數(shù)為300（即0.3Ａ）。信號(hào)輸出端（積分儀）為0.1Ａ/mv測(cè)定靈敏度可由計(jì)算機(jī)軟件設(shè)定。
七．注意事項(xiàng)
１．儀器工作時(shí)不受到任何震動(dòng)。
２．工作室溫度要求恒定，用0.2Ａ以下量程時(shí)，必須具備恒溫條件，而且儀器需預(yù)２小時(shí)以上。
３．Ｔ調(diào)零機(jī)器出廠時(shí)已校準(zhǔn)，更換光電倍增管需重新校準(zhǔn)。
４．開機(jī)工作時(shí)不得拆下樣品池架，以免強(qiáng)光照射光電倍增管損壞。
上海琪特分析儀器有限公司：http://www.shqite.com
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