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大鼠Ca2+-ATPElisa試劑盒說明書
目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,組織及相關(guān)液體樣本中Ca2+-ATP酶的活性。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Ca2+-ATP酶水平。用純化的大鼠Ca2+-ATP酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Ca2+-ATP酶,再與HRP標(biāo)記的Ca2+-ATP酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ca2+-ATP酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠Ca2+-ATP酶濃度。
大鼠Ca2+-ATPElisa試劑盒說明書
1. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
2. 底物請避光保存。
3. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
4. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
5. 本試劑不同批號組分不得混用。
如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值 代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
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