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western 和ELISA 處理樣本的區(qū)別

閱讀：508發(fā)布時(shí)間：2015-8-3

根據(jù)實(shí)驗(yàn)分析，將western和Elisa處理樣本卻別比對(duì)出來(lái)，分析給客戶。

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液，然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul，做復(fù)孔，每個(gè)樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時(shí)要大于200ul每支），直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存，一樣避免反復(fù)凍融。

不過(guò)ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，或者查閱文獻(xiàn)，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn)，或者濃度過(guò)低，小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。



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