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技術文章

滴加抗體注意事項

閱讀：410發(fā)布時間：2015-9-21

在做實驗之前必須確定確定試劑盒樣本是否收集完成，樣本收集量以及保存情況，樣本是否出現溶血情況，準備實驗前是否做好序號標記情況。因為每次實驗前應列出詳細實驗計劃，其中包括實驗目的、擬用方法、所用一抗和二抗的種類和效價、預實施的操作流程方案以及預期實驗結果等。實驗分組編號用玻璃筆標記在玻片上，對每一抗體均應配以陽性和陰性對照。以下關于滴加抗體操作注意事項作出詳細講解。

      切片在血清封閉后，傾去多余血清，便可滴加*抗體。滴加前取出玻片，用吸水紙拭去組織周圍的液體，組織與細胞表面的液體要用濾紙條輕輕吸掉，但注意勿使 組織干燥，盡快滴加抗體工作液1滴(約50ul)于組織表面。由于切片周圍無液體，滴加的抗體成為一個液滴，這樣既可節(jié)省抗體，又可增加抗原與抗體結合的 機會。如果玻片上是培養(yǎng)細胞，應在鏡下選擇一個理想的區(qū)域用免疫組織化學油筆在此區(qū)域外圍畫一圓圈，再滴加抗體，爾后應輕輕搖動切片數秒，以促進抗體與組 織待測抗原的結合，避免假陰性小區(qū)的出現。這一操作過程雖然簡單，卻十分重要。加抗體時切忌加樣器或吸頭碰到組織或細胞，以免造成破損。


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