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滴加抗體注意事項(xiàng)

閱讀：403發(fā)布時(shí)間：2015-9-21

在做實(shí)驗(yàn)之前必須確定確定試劑盒樣本是否收集完成，樣本收集量以及保存情況，樣本是否出現(xiàn)溶血情況，準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)前是否做好序號(hào)標(biāo)記情況。因?yàn)槊看螌?shí)驗(yàn)前應(yīng)列出詳細(xì)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃，其中包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、擬用方法、所用一抗和二抗的種類(lèi)和效價(jià)、預(yù)實(shí)施的操作流程方案以及預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。實(shí)驗(yàn)分組編號(hào)用玻璃筆標(biāo)記在玻片上，對(duì)每一抗體均應(yīng)配以陽(yáng)性和陰性對(duì)照。以下關(guān)于滴加抗體操作注意事項(xiàng)作出詳細(xì)講解。

      切片在血清封閉后，傾去多余血清，便可滴加*抗體。滴加前取出玻片，用吸水紙拭去組織周?chē)囊后w，組織與細(xì)胞表面的液體要用濾紙條輕輕吸掉，但注意勿使 組織干燥，盡快滴加抗體工作液1滴(約50ul)于組織表面。由于切片周?chē)鸁o(wú)液體，滴加的抗體成為一個(gè)液滴，這樣既可節(jié)省抗體，又可增加抗原與抗體結(jié)合的 機(jī)會(huì)。如果玻片上是培養(yǎng)細(xì)胞，應(yīng)在鏡下選擇一個(gè)理想的區(qū)域用免疫組織化學(xué)油筆在此區(qū)域外圍畫(huà)一圓圈，再滴加抗體，爾后應(yīng)輕輕搖動(dòng)切片數(shù)秒，以促進(jìn)抗體與組 織待測(cè)抗原的結(jié)合，避免假陰性小區(qū)的出現(xiàn)。這一操作過(guò)程雖然簡(jiǎn)單，卻十分重要。加抗體時(shí)切忌加樣器或吸頭碰到組織或細(xì)胞，以免造成破損。


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