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大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒使用方法

閱讀:326發(fā)布時間:2016-06-15

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檢測范圍:                                                          48T

0.5μg/L -20μg/L

 

使用目的:

    本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本α顆粒膜蛋白(GMP-140)含量

實驗原理

       本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)水平。用純化的大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α顆粒膜蛋白(GMP-140),再與HRP標記的α顆粒膜蛋白(GMP-140)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α顆粒膜蛋白(GMP-140)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)濃度。

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

3ml×1瓶

2

酶標試劑

3ml×1瓶

8

標準品(40μg/L

0.5ml×1瓶

3

標包被

12孔×4條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

3ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

  • 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

20μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

10μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

5μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.25μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


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