1、1MTris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）
　　
　　□組份濃度1MTris-HCl
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.稱量121.1gTris置于1L燒杯中。
　　
　　2.加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />　　
　　3.按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。
　　
　　pH值濃HCl
　　
　　7.4約70mL
　　
　　7.6約60mL
　　
　　8.0約42mL
　　
　　4.將溶解定容至1L。
　　
　　5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
　　
　　注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門(mén)ris溶液的pH值隨溫度的變化差很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
　　
　　2、1.5MTris-HCl（pH8.8）
　　
　　□組份濃度1.5MTris-HCl
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.稱取181.7gTris置于1L燒杯中。
　　
　　2.加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />　　
　　3.用濃鹽酸調(diào)pH值至8.8。
　　
　　4.將溶液定容至1L。
　　
　　5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
　　
　　注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門(mén)ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
　　
　　3、10×TEBuffer（pH7.4，7.6，8.0）
　　
　　□組份濃度100mMTris-HCl，10mMEDTA
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。
　　
　　1MTris-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL
　　
　　500mMEDTA（pH8.0）20mL
　　
　　2.向燒杯中加入約800mL的去離子水，均勻混合。
　　
　　3.將溶液定至1L后，高溫高壓滅菌。
　　
　　4.室溫保存。
　　
　　4、3M醋酸鈉（pH5.2）
　　
　　□組份濃度3M醋酸鈉
　　
　　□配制量100mL
　　
　　□配置方法1.稱取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL燒杯中，加入約40mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?br />　　
　　2.加入冰乙酸調(diào)節(jié)pH值至5.2。
　　
　　3.加入去離子水將溶液定容至100mL。
　　
　　4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
　　
　　5、PBSBuffer
　　
　　□組份濃度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中。
　　
　　NaCl8g
　　
　　KCl0.2g
　　
　　Na2HPO41.42g
　　
　　KH2PO40.27g
　　
　　2.向燒杯中加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />　　
　　3.滴加HCl將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1L。
　　
　　4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。
　　
　　注意：上述PBSBuffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。
　　
　　6、10M醋酸銨
　　
　　□組份濃度10M醋酸銨
　　
　　□配制量100mL
　　
　　□配置方法1.稱量77.1g醋酸銨置于100～200mL燒杯中，加入約30mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?br />　　
　　2.加去離子水將溶液定容至100mL。
　　
　　3.使用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
　　
　　4.密封瓶口于室溫保存。
　　
　　注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。
　　
　　7、Tris-HCl平衡*
　　
　　□配置方法
　　
　　1.使用原料：大多數(shù)市售液化*是清亮無(wú)色的，無(wú)需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化*呈粉紅色或黃色，應(yīng)避免使用。同時(shí)也應(yīng)避免使用結(jié)晶*，結(jié)晶*必須在160℃對(duì)其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物，這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此，*的質(zhì)量對(duì)DNA、RNA的提取極為重要，我們推薦使用高質(zhì)量的*進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
　　
　　2.操作注意：*腐蝕性*，并可引起嚴(yán)重灼傷，操作時(shí)應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。所有操作均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行，與*接觸過(guò)的皮膚部位應(yīng)用大量水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。
　　
　　3.*平衡：因?yàn)樵谒嵝詐H條件下DNA分配于有機(jī)相，因此使用*前必須對(duì)*進(jìn)行平衡使其pH值達(dá)到7.8以上，*平衡操作方法如下：
　　
　?、僖夯?應(yīng)貯存于-20℃，此時(shí)的*呈現(xiàn)結(jié)晶狀態(tài)。從冰柜中取出的*首先在室溫下放置使其達(dá)到室溫，然后在68℃水浴中使*充分溶解。
　　
　?、诩尤肓u基喹啉（8-Quinolinol）至終濃度0.1％。該化合物是一種還原劑、RNA酶的不*抑制劑及金屬離子的弱螯合劑，同時(shí)因其呈黃色。有助于方便識(shí)別有機(jī)相。
　　
　?、奂尤氲润w積的1MTris-HCl（pH8.0），使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
　　
　?、苤貜?fù)操作步驟③。
　　
　　⑤加入等體積的0.1MTris-HCl（pH8.0），使用磁力攪拌器攪拌15分鐘，靜置使其充分分層后，除去上層水相。
　　
　　⑥重復(fù)操作步驟⑤，稍微殘留部分上層水相。
　　
　?、呤褂胮H試紙確認(rèn)有機(jī)相的pH值大于7.8。
　　
　?、鄬?置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
　　
　　13、20％（W/V）Glucose
　　
　　□組份濃度20％（W/V）Glucose
　　
　　□配制量100mL
　　
　　□配置方法1.稱取20gGlucose置于100～200mL燒杯中，加入約80mL的去離子水后，攪拌溶解。
　　
　　2.加去離子水將溶液定容至100mL。
　　
　　3.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
　　
　　14、SolutionI（質(zhì)粒提取用）
　　
　　□組份濃度25mMTris-HCl（pH8.0），10mMEDTA，50mMGlucose
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。
　　
　　1MTris-HCl（pH8.0）25mL
　　
　　0.5MEDTA（pH8.0）20mL
　　
　　20％Glucose（1.11M）45mL
　　
　　dH2O910mL
　　
　　2.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
　　
　　3.使用前每50mL的SoliutionI中加入2mL的RNaseA（20mg/mL）。
　　
　　15、SolutionII（質(zhì)粒提取用）
　　
　　□組份濃度250mMNaOH，1％（W/V）SDS
　　
　　□配制量500mL
　　
　　□配置方法1.量取下列溶液置于500mL燒杯中。
　　
　　10％SDS50mL
　　
　　2NNaOH50mL
　　
　　2.加滅菌水定容至500mL，充分混勻。
　　
　　3.室溫保存。此溶液保存時(shí)間不要超過(guò)一個(gè)月。
　　
　　注意：SDS易產(chǎn)生氣泡，不要?jiǎng)×覕嚢琛?br />　　
　　16、SolutionIII（質(zhì)粒提取用）
　　
　　□組份濃度3MKOAc，5MCH3COOH
　　
　　□配制量500mL
　　
　　□配置方法1.量取下列溶液置于500mL燒杯中。
　　
　　KOAc147g
　　
　　CH3COOH57.5mL
　　
　　2.加入300mL去離子水后攪拌溶解。
　　
　　3.加去離子水將溶液定容至500mL。
　　
　　4.高溫高壓滅菌后，4℃保存。
　　
　　17、0.5MEDTA(pH8.0)
　　
　　□組份濃度0.5MEDTA
　　
　　□配制量1L
　　
　　□配置方法1.稱取186.1gNa2EDTA•2H2O，置于1L燒杯中。
　　
　　2.加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢琛?br />　　
　　3.用NaOH調(diào)節(jié)pH值值8.0（約20gNaOH）。
　　
　　注意：pH值至8.0時(shí)，EDTA才能*溶解。
　　
　　4.加去離子水將溶液定容至1L。
　　
　　5.適量分成小份后，高溫高壓滅菌。
　　
　　6.室溫保存。
　　
　　18、1MDTT
　　
　　□組份濃度1MDTT
　　
　　□配制量20mL
　　
　　□配置方法1.稱取3.09gDTT，加入到50mL塑料離心管內(nèi)。
　　
　　2.加20mL的0.01M的NaOAc（pH5.2），溶解后使用0.22μm濾器過(guò)濾除菌。
　　
　　3.適量分成小份后，-20℃保存。
　　
　　19、10mMATP
　　
　　□組份濃度10mMATP
　　
　　□配制量20mL
　　
　　□配置方法1.稱取121mgNa2ATP•3H2O，加入到50mL塑料離心管內(nèi)。
　　
　　2.加20mL的25mMTris-HCl（pH8.0），攪拌溶解。
　　
　　3.適量分成小份，-20℃保存。
　　
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