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動物實驗基本操作之“麻醉方法”

時間:2014-3-11閱讀:1521
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  麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺,保障實驗動物的安全,使動物在實驗中服從操作,確保實驗順利進(jìn)行。
  
  一、常用的麻醉劑
  
 ?。ㄒ唬﹦游飳嶒炛谐S玫穆樽韯┓譃槿?,即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。
  
  1、揮發(fā)性麻醉劑
  
  包括乙。mi、氯仿等,乙mi吸入麻醉適用于各種動物,其麻醉量和致死量差距大,所以安全度亦大,動物麻醉深度容易掌握,而且麻后蘇醒較快。其缺點是對局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多,再通過神經(jīng)反射可影響呼吸、血壓和心跳活動,并且容易引起窒息,故在乙mi吸入麻醉時必需有人照看,以防麻醉過深而出現(xiàn)以上情況。
  
  2、非揮發(fā)性麻醉劑
  
  這類麻醉劑種類較多,包括苯*鈉、戊*鈉、硫噴妥鈉等*類的衍生物,氨基甲酸乙脂和*。這些麻醉劑使用方便,一次給藥可維持較長的麻醉時間,麻醉過程較平衡,動物無明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點是蘇醒較慢。
  
  3、中藥麻醉劑
  
  動物實驗時有時也用到象洋金花和*等中藥麻醉劑,但由于其作用不夠穩(wěn)定,而且常需加佐劑麻醉效果才能理想,故在使用過程中不能得到普及,因而,多數(shù)實驗室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。
  
  (二)幾種常用的麻醉藥及其用法
  
  1、氨基甲酸乙酯(烏拉坦)
  
  常用于兔、狗、貓、蛙類等動物。本藥易溶于水,常配成20%或25%的注射液,注射時可先快后慢,一次給藥可維持4~5h,麻醉過程較平穩(wěn),動物無明顯掙扎現(xiàn)象,但動物蘇醒慢,麻醉深度和使用劑量較難掌握。
  
  2、*類
  
  用于動物實驗的主要有三種:戊*鈉,苯*鈉,硫噴妥鈉。其中zui常用的是戊*鈉,常配成3%~5%的注射液。此藥作用發(fā)生快,持續(xù)時間3~5h。配制方法:戊*鈉3~5g加入95%乙醇溶液l0ml,加溫助溶(不可煮沸)后,再加入0.9%氯化鈉溶液至l00ml。靜脈注射時,前1/3劑量可推注,后2/3劑量則應(yīng)緩慢注射,并密切觀察動物的肌緊張狀態(tài),呼吸變化及角膜反射。動物麻醉后常因麻醉藥的作用以及肌肉松弛和皮膚血管擴(kuò)張而致使體溫緩慢下降,所以應(yīng)設(shè)法保溫,不使肛溫降至37℃以下。
  
  3、氯醛糖
  
  此藥溶解度小,常配成1%水溶液,使用前需在50℃水浴鍋中加熱使其全部溶解,但不宜直接加熱,更不能煮沸,以免影響藥效。加溫后不宜久置,以免沉淀而失效。配制時若加入適量硼砂,可提高其溶解度和穩(wěn)定性。一般取氯醛糖1g,硼砂2g,加水至100ml。
  
  4、普魯卡因
  
  局部注射麻醉藥。手術(shù)前,常用1%或2%水溶液注入手術(shù)部位皮下或肌肉,阻斷神經(jīng)纖維的傳導(dǎo),提高感受器官的感覺閾值,因而能夠耐受手術(shù)操作。
  
  5、乙mi
  
  吸入性麻醉藥,可用于各種動物,尤其是時間短的手術(shù)或?qū)嶒?,吸入?0~30s開始發(fā)揮作用。其特點是,麻醉深度易掌握,較安全,麻醉后蘇醒快,但麻醉時有明顯的興奮現(xiàn)象,且對呼吸道黏膜有較強的刺激分泌作用,使黏液分泌增加,易阻塞呼吸道而發(fā)生窒息。乙mi為無色,易揮發(fā),有刺激性氣味的液體,易燃燒和爆炸,在光和空氣作用下,可生成乙醛或過氧化物而具有較大毒性,因此,開瓶后不能久置。
  
  二、動物的麻醉方法
  
  1、全身麻醉
  
 ?。?)吸入法
  
  用一塊圓玻璃板和一個鐘罩或一個密閉的玻璃箱作為揮發(fā)性麻醉劑的容器,多選用乙mi作麻藥。麻醉時用幾個棉球,將乙mi倒入其中,迅速轉(zhuǎn)入鐘罩或箱內(nèi),讓其揮發(fā),然后把待麻醉動物投入,約隔4~6分鐘即可麻醉,麻醉后應(yīng)立即取出,并準(zhǔn)備一個蘸有乙mi的棉球小燒杯,在動物麻醚變淺時給套在鼻上使其補吸麻藥。本法zui適于大、小鼠的短期操作性實驗的麻醉,也可用于較大的動物。
  
  由于乙mi燃點很低,遇火極易燃燒,所以在使用時,一定要遠(yuǎn)離火源。
  
 ?。?)腹腔和靜脈給藥麻醉法
  
  非揮發(fā)性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉,操作簡便,是實驗室zui常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠,較大的動物如兔、狗等則多用靜脈給藥進(jìn)行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時,一定要控制藥物的濃度和注射量。
  
  2、局部麻醉
  
 ?、咆埖木植柯樽硪话銘?yīng)用0.5~1.0%*注射。粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可ka因。
  
 ?、仆迷谘矍蚴中g(shù)時,可于結(jié)膜囊滴入0.02%鹽酸可ka因溶液,數(shù)秒鐘即可出現(xiàn)麻醉。
  
 ?、枪返木植柯樽碛?.5~1%*注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可ka因。
  
  3、麻醉效果的觀察
  
  動物的麻醉效果直接影響實驗的進(jìn)行和實驗結(jié)果。如果麻醉過淺,動物會因疼痛而掙扎,甚至出現(xiàn)興奮狀態(tài),呼吸心跳不規(guī)則,影響觀察。麻醉過深,可使機體的反應(yīng)性降低,甚至消失,更為嚴(yán)重的是抑制延髓的心血管活動中樞和呼吸中樞,使呼吸、心跳停止,導(dǎo)致動物死亡。因此,在麻醉過程中必須善于判斷麻醉程度,觀察麻醉效果。
  
  判斷麻醉程度的指標(biāo)有:
  
 ?、俸粑杭涌旎虿灰?guī)則,則麻醉過淺,可再追加麻醉,若呼吸由不規(guī)則轉(zhuǎn)變?yōu)橐?guī)則且平穩(wěn),說明已達(dá)到麻醉深度。若動物呼吸變慢,且以腹式呼吸為主,說明麻醉過深,動物有生命危險。
  
 ?、诜瓷浠顒樱航悄し瓷潇`敏,則麻醉過淺;反射遲鈍,麻醉程度適宜;反射消失,伴瞳孔散大,則麻醉過深。
  
  ③肌張力:亢進(jìn),麻醉過淺;全身肌肉松弛,麻醉合適。
  
 ?、芷つw夾捏反應(yīng):麻醉過程中可隨時用*或有齒鑷夾捏動物皮膚,若反應(yīng)靈敏,則麻醉過淺;若反應(yīng)消失,則麻醉程度合適。
  
  三、使用麻醉劑的注意事項
  
 ?。ㄒ唬┳⒁鈩游飩€體差異不同的動物個體對麻醉劑的耐受性不同。在使用麻醉劑時,必須密切注意觀察動物的狀態(tài),以決定麻醉藥用量。麻醉的深淺,可根據(jù)呼吸的深度和頻率、角膜反射的敏感度、四肢和腹壁肌肉的緊張性以及皮膚夾捏反應(yīng)等指標(biāo)進(jìn)行判斷。當(dāng)上述指標(biāo)明顯減弱或消失時,應(yīng)立即停止給藥。
  
  另外,麻醉劑量往往與動物的種類、健康狀況有關(guān)。如灰兔比大白兔抵抗力要強;妊娠兔對麻醉藥的耐受量較小,如按常規(guī)劑量麻醉往往會過量,使用時應(yīng)酌減原劑量。
  
 ?。ǘ┳⒁饨o藥速度在采用靜脈注射麻醉藥時,注射速度應(yīng)緩慢;或者藥量的前一半快速注入,使其迅速渡過興奮期,后一半藥緩慢注入。如果沒有把握,不要給全量,麻醉稍淺可追加藥量,否則注射過速,用藥過量,易導(dǎo)致動物死亡。
  
  靜脈注射必須緩慢,同時觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動明顯減弱或消失時,立即停止注射。配制的藥液濃度要適中,不可過高,以兔麻醉過急;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。
  
 ?。ㄈ┳⒁饴樽韯┑男迈r度麻醉劑配制時間過久,發(fā)生絮狀混濁及冷天有結(jié)晶沉淀,均不宜使用。后者經(jīng)加熱,結(jié)晶溶解還可使用。
  
 ?。ㄋ模┳⒁庋a加麻醉劑的方法當(dāng)麻醉深度不夠,動物出現(xiàn)掙扎、呼吸急促等反應(yīng),可臨時適當(dāng)補加麻醉劑,一般每次補加劑量不宜超過注射總量的1/10~1/5。
  
 ?。ㄎ澹┳⒁怏w重與麻醉劑量的關(guān)系麻醉前一定要先稱動物體重,然后嚴(yán)格按照參考劑量給藥。
  
 ?。┳⒁饴樽磉^量的處理當(dāng)麻醉過量時,動物呼吸慢而不規(guī)則,甚至呼吸停止,血壓下降,心跳微弱或停止。此時應(yīng)立即進(jìn)行搶救,如進(jìn)行人工呼吸和心臟按摩,必要時用蘇醒劑。
  
 ?。ㄆ撸┞樽頃r需注意保溫。麻醉期間,動物的體溫調(diào)節(jié)機能往往受到抑制,出現(xiàn)體溫下降,可影響實驗的準(zhǔn)確性。此時常需采取保溫措施。保溫的方法有,實驗桌內(nèi)裝燈,電褥,臺燈照射等。無論用哪種方法加溫都應(yīng)根據(jù)動物的肛門體溫而定。
  
  常用實驗動物正常體溫
  
  貓為38.6℃±1.0℃
  
  兔為38.4℃±1.0℃
  
  大鼠為39.3℃±0.5℃。
  
 ?。ò耍┳髀詫嶒灂r,在寒冷冬季,麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動物體溫水平。
  
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