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人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)說明書

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人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)說明書

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)水平。用純化的人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP),再與HRP標(biāo)記的脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)含量。

人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)說明書

試劑盒組成
說明書
封板膜
密封袋
酶標(biāo)包被板
標(biāo)準(zhǔn)品:4500pg/mL
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
酶標(biāo)試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液
顯色劑B液
終止液
濃縮洗滌液

人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)說明書

操作步驟

  1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為3000 pg/mL,2000 pg/mL ,1000 pg/mL,500 pg/mL,250 pg/mL)。
  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。
  4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗滌:操作同5。
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分鐘.
  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)說明書

小鼠單核細(xì)胞分離液100ML價(jià)格
蛋白質(zhì)Western blotting10×TBST100ML價(jià)格
9002-17-9,黃嘌呤氧化酶,Xanthione oxidase,XOD
96T/48T,Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit,人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
9007-83-4,γ-球蛋白(牛),牛丙種球蛋白,普通丙種球蛋白,γ-Globulins from bovine blood
56-40-6,*,氨基乙酸,氨基醋酸,Glycine
96T/48T,Mouse Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit,小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒
GFAP,雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白Elisa試劑盒
SCCAg,人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原Elisa試劑盒

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