豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候,被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測(cè)人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒的優(yōu)勢(shì):
全面——混合8種不同的常見抗原,對(duì)自身免疫性疾病進(jìn)行全面篩查。
快速——檢測(cè)時(shí)間短(~2小時(shí)),確診時(shí)間更早。
準(zhǔn)確——ELISA檢測(cè)方法,靈敏度高,特異性強(qiáng),適用性好。
質(zhì)優(yōu)——*開發(fā),高品質(zhì)及高可靠性的分析性能。
價(jià)低——國內(nèi)自生產(chǎn),符合國內(nèi)實(shí)情,降低生產(chǎn)成本
豬白介素18(IL-18)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
豬白介素1α(IL-1α)ELISAKit酵素免疫分析法 【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
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豬白介素2(IL-2)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
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豬白介素4(IL-4)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
豬白介素-5(IL-5)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
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豬*(NE)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
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豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
豬食欲素受體(OXR)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
豬骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測(cè)》———技術(shù)指導(dǎo)
檢測(cè)限的測(cè)定 可添加MRL和MRL上下各一個(gè)濃度。
每個(gè)試驗(yàn)室在使用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)時(shí),豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑應(yīng)做一下各自試驗(yàn)室的檢測(cè)限。檢測(cè)限為20份空白樣品測(cè)定的均值加3倍標(biāo)準(zhǔn)差。如果經(jīng)規(guī)范操作后所得檢測(cè)限大于臨界值時(shí),說明試劑盒背景干擾大,試劑盒靈敏度不能滿足檢測(cè)要求,應(yīng)與試劑盒廠家或棄去不用選用另外的試劑盒。
標(biāo)本/陰性對(duì)照比值
豬活化素A(ACV-A)ELISA試劑在實(shí)驗(yàn)條件(包括)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的A值后,計(jì)算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計(jì)算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。