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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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閱讀:344發(fā)布時(shí)間:2015-1-5
利用不同容量的角式轉(zhuǎn)頭及很容易配制的梯度液,在各種型號的超速離心機(jī)上都能得到滿意的分離結(jié)果。下面舉了幾個(gè)分離實(shí)例,實(shí)際上還可以應(yīng)用于各種型號各種容量的固定角式轉(zhuǎn)頭。
(一) 梯度液
A液:11.40gNacl,0.1g EDTA-Na2,置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1
ml 1N NaOH,混勻至全部溶解。加重蒸水至1000mlzui后再加3ml重蒸水(Nacl:0.195mol)。終密度1.006g/cm3,PH10.37。
B液:加24.98g NaBr 到100ml A液中。終密度1.182g/cm3。(Nacl:0.195mol, NaBr:7.65mol),PH9.72。
C液:加78.32g NaBr 到100ml A液中。終密度1.478g/cm3。(Nacl:0.195mol, NaBr:7.65mol),PH8.86。
(二) 離心機(jī)及轉(zhuǎn)頭
? 離心機(jī):Hitachi CP-MX系列超速離心機(jī)或其他類似機(jī)組。
Hitachi CS-150GXL微量超速離心機(jī)。
? 轉(zhuǎn)頭,離心管;S 140 AT:140,000rpm,1,050,000×g,10×2ml,K=5,1PC厚壁管。
S 80 AT3:80,000rpm,415,000×g,8×8ml,K=23,6PC厚壁管。
S 70 AT:70,000rpm,505,000×g,8×40ml,K=44,40PA管。
(三) 血漿-血球分離:
全血,角轉(zhuǎn)頭或甩平轉(zhuǎn)頭3000rpm×20min,沉淀為血細(xì)胞,上清血漿待用。
(四) 乳糜粒分離:
? 離心參數(shù):各種轉(zhuǎn)頭均可用,4×106(g×min),10℃
? 梯度液:離心管下部3/4容積為血漿,上部1/4容積為0.15MNacl+0.3MEDTA。PH7.4。
? 離心結(jié)果:乳糜粒上浮,離心管傾斜,吸管貼管壁慢吸出(約占血漿容積的2~6%。禁令12小時(shí)以上供血者血漿中乳糜含量很低,食后供血者含量較高。
(五) 血清脂蛋白分離:
(?。¬LDL分離(ρ<1.006g/cm3)
轉(zhuǎn)頭 | 離心管內(nèi)液體分布 | 離心參數(shù) | 結(jié)果 |
S140AT (CS-150GXL機(jī)組) | 下部600μl血漿 上部300μl A液 | 140,000rpm×50min 16℃ 加速:5 減速:7 | 可見明顯分層上部約1/3VLDL吸出 |
S80AT3 (CS-150GXL機(jī)組) | 下部3.4ml血漿 上部1.7mlA液 | 80,000rpm×4.5hrs 16℃ 加速:5 減速:7 | 同上 |
P70AT (CP-MX機(jī)組) | 下部24ml血漿 上部11.7ml A液 | 70,000rpm×8hrs 16℃ 加速:5 減速:7 | 同上 |
(ⅱ)LDL(含IDL)分離(1.006g/cm3<ρ<1.063g/cm3)
轉(zhuǎn)頭 | 離心管內(nèi)液體分布 | 離心參數(shù) | 結(jié)果 |
S140AT (CS-150GXL機(jī)組) | *次離心后上部VLDL取出,下部600μl移入另一離心管,加入300μl B液,充分混合 | 140,000rpm×80min 16℃ 加速:9 減速:7 | 上部1/3體積LDL+IDL吸出 |
S80AT3 (CS-150GXL) | *次離心后上部VLDL吸出,,下部3.4ml移入另一離心管,加入1.7ml B液并充分混合 | 80,000rpm×5.5hrs 16℃ 加速:9減速:7 | 同上 |
P70AT (CP-MX系列超速機(jī)或類似機(jī)型) | *次離心后上部11.7ml吸出,下部約24ml 移入另一離心管,加入11.7ml B液,充分混合 | 70,000rpm×10hrs 16℃ 加速:9 減速:6 | 同上 |
(ⅲ)HDL分離(1.063g/cm3<ρ<1.21g/cm3)
轉(zhuǎn)頭 | 離心管內(nèi)液體分布 | 離心參數(shù) | 結(jié)果 |
S140AT (CS-150GXL機(jī)組) | 第二次離心后吸出上部300μl后,下部600μl移入另一離心管,加入300μl C液,充分混合 | 140,000rpm×140min 16℃ 加速:9 減速:7 | 可見較明顯分層, 上部為HDL,下部為血清白蛋白及球蛋白 |
S80AT3 (CS-150GXL機(jī)組) | 第二次離心后吸出上部約1.7ml、下部3.4ml移入另一離心管,加入1.7ml C液,充分混合 | 80,000rpm×8小時(shí) 16℃ 加速:9 減速:7 | 同上 |
P70AT (CP-MX系列機(jī)或其他類型機(jī)組) | 第二次離心后吸出上部1/3、下部2/3移入另一離心管,加入約12ml C液,充分混合 | 70,000rpm×15小時(shí) 16℃ 加速:9 減速:6 | 同上 |
商鋪:http://www.kytsldc.cn/st121272/
主營產(chǎn)品:傳染病ELISA試劑盒,棉酚標(biāo)準(zhǔn)品,酸性磷酸酶, 頂層培養(yǎng)基(Ames試驗(yàn)) ,HMGB1 ELISA試劑盒,葉綠素A,胎牛血清,熱線電話:021-64055267
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