上海滬震培訓（細胞凍存和復蘇的方法）僅共參考

細胞凍存前，仔細檢查細胞凍存所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：傳代細胞單層、適宜生長液、滅活小牛血清、慶大霉素溶液、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶溶液、標簽用具：100ml方瓶（培養(yǎng)細胞用）、克氏瓶、紅翻帽塞、吸管（10ml、lml）、細胞凍存管、二甲基亞砜、CO2孵箱、超掙臺、倒置顯微鏡、2～8℃冰箱、-20℃冰箱、液氮罐

細胞凍存開：人羊膜細胞,WISH細胞

1．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞24小時前換液一次。

2．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達5×106/ml，離心去上清，吸入離心管中。

3．凍存液：先用培養(yǎng)液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。

4．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加1.5毫升細胞懸液。

5．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；人羊膜細胞,WISH細胞如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。

復蘇方法

1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。

2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。

3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。

4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。

5．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。

人羊膜細胞,WISH細胞公司其它相關(guān)產(chǎn)品:

HZB246Hu    人細胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cytokeratin Fragment Antigen 21-1 (CYFRA21-1)
HZB283Hu    人上皮細胞粘附分子(EPCAM)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Epithelial Cell Adhesion Molecule (EPCAM)
HZB307Hu    人纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Fibrinopeptide B (FPB)
HZB389Hu    人含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing Protein 2 (vWA2)
HZB390Hu    人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Adenosine Deaminase (ADA)
HZB403Hu    人腺苷酸環(huán)化酶2(ADCY2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Adenylate Cyclase 2, Brain (ADCY2)
HZB406Hu    人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)
HZB408Hu    人原卟啉(EPP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Erythrocyte Protoporphyrin (EPP)
CEB409Hu    人血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Hemoglobin (HB)
HZB429Hu    人多巴胺β羥化酶(DβH)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Dopamine Beta Hydroxylase (DbH)
HZB438Hu    人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)
HZB524Hu    人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein (NAIP)
HZB530Hu    人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Plaet Membrane Glycoprotein IV (GP4)
HZA695Hu    人髓樣前體細胞抑制因子2(MPIF2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)
HZA957Hu    人Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Procollagen I N-Terminal Propeptide (PINP)
HZA976Hu    人維甲酸受體α(RARα)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Alpha (RARa)人羊膜細胞,WISH細胞
HZB737Hu    人信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 6 (STAT6)
HZB738Hu    人信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription (STAT)
HZB739Hu    人信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 4 (STAT4)
HZA663Hu    人Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)
HZA449Hu    人胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Caspase 7 (CASP7)
HZA450Hu    人激肽釋放酶4(KLK4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 4 (KLK4)
HZA214Hu    人窖蛋白(CAV1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)