ELISA試劑盒方法的基本操作原理介紹

常用的小鼠Ⅻ型膠原(COL12)試劑盒法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。酶聯(lián)免疫吸附試驗：是酶免疫測定技術中應用zui廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體( 聚苯乙烯微量反應板 )表面，使酶標記的抗原-抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。

1、競爭ELISA：此法主要用于測定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射免疫測定。

其基本程序為：

① 抗體包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

② 加入待檢抗原及一定量的酶標抗原小鼠Ⅻ型膠原(COL12)試劑盒（對照孔僅加酶標抗原）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液

④ 用ELISA檢測儀測定OD值。

   被結合的酶標抗原的量由酶催化底物反應產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多，被結合的標記抗原的量就越少，有色產(chǎn)物就減少，這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測；其主要不足在于每種抗原都要進行酶標記，而且因為抗原的結構不同，還需應用不同的結合方法。此外試驗中應用酶標抗原的量較多。

2、阻斷ELISA

   本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽狂犬?。?/span>PR）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測方法。

下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序：

① 小鼠Ⅻ型膠原(COL12)試劑盒100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

② 用200μl阻斷緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干

⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液

⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。

本試驗同時設標準陰、陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。

小鼠Ⅻ型膠原(COL12)試劑盒公司其它相關產(chǎn)品：

HZB653Hu    人肌肉生長抑制素(MSTN)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Myostatin (MSTN)
CEA970Hu    人乙酰輔酶A(A-CoA)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Acetyl Coenzyme A (A-CoA)
HZA965Hu    人α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Alpha-2-Microglobulin Like Protein 1 (a2ML1)
HZB667Hu    人肌聯(lián)蛋白(TTN)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Titin (TTN)
HZB668Hu    人高爾基蛋白73(GP73)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Golgi Protein 73 (GP73)
HZA971Hu    人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Glypican 3 (GPC3)
HZB670Hu    人黑素瘤細胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM)
HZA967Hu    人激肽釋放酶1(KLK1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 1 (KLK1)
CEB682Hu    人免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Immunoglobulin G2 (IgG2)
HZB684Hu    人細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3)
HZB686Hu    人B-細胞激活因子(BAFF)ELISA試劑盒    ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF)
HZB688Hu    人白介素21(IL21)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 21 (IL21)
HZB689Hu    人白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 28A (IL28A)
HZB690Hu    人滲透性糖蛋白(Pgp)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Permeability Glycoprotein (Pgp)
HZB691Hu    人角蛋白10(KRT10)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Keratin 10 (KRT10)
HZB693Hu    人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte (FABP4)
HZB694Hu    人白介素25(IL25)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 25 (IL25)
HZB695Hu    人白介素26(IL26)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 26 (IL26)
HZB696Hu    人血管內(nèi)皮生長因子165(VEGF165)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 165 (VEGF165)
HZB697Hu    人α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Alpha-1-Antitrypsin (a1AT)
HZB698Hu    人乳酸脫氫酶B(LDHB)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase B (LDHB)
HZB699Hu    人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3)
HZB758Hu    人核糖核酸酶A3(RNASE3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Ribonuclease A3 (RNASE3)
HZB707Hu    人髓分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Myeloid Differentiation Factor 88 (MyD88)
HZB708Hu    人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1)
HZB710Hu    人糖盞蛋白(GC)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Glycocalicin (GC)
HZB712Hu    人Kruppel樣因子5(KLF5)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Kruppel Like Factor 5, Intestinal (KLF5)
HZB740Hu    人信號傳導轉(zhuǎn)錄激活因子1(STAT1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 1 (STAT1)