人胸腺激酶缺陷性細胞系操作前打開紫外燈30-60分鐘，這個大家都知道。不過你別忘了還要在操作前至少10分鐘打開抽濾裝置來保證效果，但紫外消毒期間建議不要進去一次特意打開抽濾裝置，可以與紫外燈一起打開，人胸腺激酶缺陷性細胞系此時不需要抽濾開的過大就可以。（所謂的抽濾裝置就是就是那個風機，就是吹風超凈工作臺，不是過濾培養(yǎng)液的）!

細胞傳代培養(yǎng)（消化法）具體操作：

一：傳代前準備；

1.預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱。

2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。

3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。

4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。

5.準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。

6.取出預熱好的培養(yǎng)用液：人胸腺激酶缺陷性細胞系取出已經(jīng)預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。

7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。

8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞，*消化溫度是37℃。

2. 人胸腺激酶缺陷性細胞系 顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。

3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。

三：吹打分散細胞；

1.吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液。

2.吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入10ml離心管中。

3.平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以1000轉/分鐘離心6-8分鐘。

4.棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入2ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。

四：分裝稀釋細胞；

1.分裝：將細胞懸液吸出分裝至2-3個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋。

2.顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于5×105/ml。zui后要做好標記。

五：繼續(xù)培養(yǎng)；

用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。人胸腺激酶缺陷性細胞系傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。當生長細胞鋪展面積占培養(yǎng)瓶底面積25％時為一個＋，占50％為＋＋，占75％時為＋＋＋。  

XY1770    615小鼠乳腺癌瘤株 Ca759細胞

XY1771    615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株 P615細胞

XY1772    615小鼠前胃癌瘤株 Fc細胞

XY1773    615小鼠滑膜肉瘤瘤株 ZM755細胞

XY1774    615小鼠肺癌瘤株

XY1775    615小鼠T細胞性白血病瘤株 L7912細胞

XY1776    5-8轉基因鼻咽癌細胞系 F2-2細胞

XY1777    293T/17人胚腎細胞,293T/17細胞

XY1778    1肝細胞

XY1779    129小鼠ES細胞,E14細胞

XY1780    129小鼠ES細胞,D3細胞

XY1781    (舌鱗癌細胞,Tca-8113細胞

XY1782    (卵巢癌細胞,HO-8910細胞

XY1783    (急性粒細胞白血病細胞) HL-60?細胞

XY1784    (肝癌細胞,SK-HEP-1細胞

XY1785    (膀胱鱗癌細胞,SCaBER細胞

XY1786    ( 胚腎細胞,)? AAV-293細胞

XY1787     轉化的非洲綠猴腎細胞,COS-7(SV40細胞

XY1788     中國倉鼠卵巢細胞,CHO細胞

XY1789     乳腺管癌 T47-D細胞

XY1790     人正常皮膚細胞,Hacat細胞

XY1791     人胃腺癌細胞（低分化） Human BGC-823細胞

XY1792     人乳腺導管癌細胞,BT474細胞

XY1793     人前列腺正常細胞,rwpe2細胞

XY1794     人胚腎細胞,293 [HEK-293] 細胞

XY1795     人結腸癌細胞,HCT-8細胞

XY1796     人肝癌細胞,hep 3B細胞

XY1797     回盲腸腺癌 HCT-8細胞

XY1798     骨髓瘤細胞株 U266細胞

XY1799     肝轉移癌 HCCLMS細胞

XY1800     分泌A2抗體B淋巴細胞,BB7.2細胞

XY1801     低分化胃腺癌 BGC-823細胞

XY1802     大鼠腎細胞,NRK-52E細胞