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人B淋巴母細胞,H9細胞

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更新時間:2017-07-31 19:09:46瀏覽次數(shù):217次

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本公司在長期的細胞研究過程中不斷優(yōu)化實驗條件,針對不同客戶研究需要,提供包含神經(jīng)元細胞、星形膠質細胞在內的多種原代細胞產(chǎn)品,并針對各類原代細胞的營養(yǎng)需求研發(fā)的培養(yǎng)產(chǎn)品。原代細胞產(chǎn)品產(chǎn)品經(jīng)過細菌、真菌、霉菌、支原體和病毒檢測,表達多種神經(jīng)細胞特異性標記。原代細胞*培養(yǎng)基特別添加能有效改善細胞生長狀態(tài)的營養(yǎng)物質和針對不同物種特別甄選的優(yōu)質培養(yǎng)液,適合各類原代細胞的體外培養(yǎng)。

開始人B淋巴母細胞,H9細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20 ml(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液*覆蓋細胞表面。至細胞*脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約24天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。

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