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上海萬(wàn)疆生物技術(shù)有限公司

萬(wàn)疆公司-細(xì)胞信息表

時(shí)間:2014-11-4閱讀:358
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細(xì)胞信息表
細(xì)胞名稱Jurkat, Clone E6-1 人T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
種屬人
組織來(lái)源急性T 細(xì)胞白血病
生長(zhǎng)狀態(tài)懸浮生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件培養(yǎng)基類型:RPMI1640(Hyclone SH30809.01B)培養(yǎng)基
FBS(GIBCO 16000-044): 10%
抗生素:雙抗
培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%
傳代方法收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):
如果沒(méi)長(zhǎng)滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮
培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代方法:
1 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*(含0.02%EDTA),讓*與大部分細(xì)胞接觸
后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變
圓后加*培養(yǎng)基終止消化。
懸浮細(xì)胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。
1 直接傳代是讓?xiě)腋〖?xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,
吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)
培養(yǎng)。
2 離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm,
5 分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞
懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
一般沒(méi)有特殊說(shuō)明,細(xì)胞一般是一傳二。
凍存方法70% *培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。
注1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。
2 在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可
離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請(qǐng)拍照并在三天內(nèi)
與我們。

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