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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2015-11-05 16:35:17瀏覽次數(shù):132次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞 293FT
SP2/0細(xì)胞中文骨髓瘤細(xì)胞 齊一生物科技(上海)有限公司產(chǎn)品已被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、化工、生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究和開發(fā)應(yīng)用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域.客戶遍布國內(nèi)各大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位.齊一生物科技(上海)有限公司:.www.qiyibio。。com
SP2/0細(xì)胞中文骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法
1、收到細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素)、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
人前列腺癌細(xì)胞 DU145
人前列腺癌細(xì)胞 PC-3
人前列腺癌細(xì)胞 LNCAP
人肺成纖維細(xì)胞 HFL1
人肝星形細(xì)胞 LX-2
張氏肝細(xì)胞 Chang Liver
表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞 HepG2.2.15
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 HCC827
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW480
人肝癌細(xì)胞 BEL-7404
人胃癌細(xì)胞 NCI-N87
人鼻咽低分化鱗癌細(xì)胞株 SUNE-1
人胚腎細(xì)胞 293[HEK-293;HEK293]
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 hFOB 1.19
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 BT474
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞 NCI-h1688改為NCI-H292
人表皮癌細(xì)胞 A431
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-175
人宮頸癌細(xì)胞 HeLa
人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901
人食管癌細(xì)胞 EC9706
人食管癌細(xì)胞 ECA109
人卵巢癌細(xì)胞 SKOV3
人肺癌細(xì)胞株 A549
人骨肉瘤細(xì)胞 MG-63
人骨髓瘤細(xì)胞 U266(U266B1)
人骨髓瘤細(xì)胞 3T3D
人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 U-937
人纖維肉瘤細(xì)胞 HT1080
人胚腎細(xì)胞 AD293
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 ACC3
人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 DLD-1
人彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤B淋巴細(xì)胞 Pfeiffer
人肝癌亞力山大細(xì)胞 PLC/PRF/5
人肝癌細(xì)胞 QGY-7703
人肝癌細(xì)胞 SMMC-7721
人肝癌細(xì)胞 SK-HEP-1
人急性成淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞 CCRF-CEM
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SH-SY5Y
人百日咳IgM(PT-IgM)檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞活化因子(BAFF)檢測(cè)試劑盒
人增殖誘導(dǎo)配體(APRIL)檢測(cè)試劑盒
人P53抗體(P53-Ab)檢測(cè)試劑盒
人總睪酮Testosterone(TotalT)檢測(cè)試劑盒
HumanMyocilin(TIGR)檢測(cè)試劑盒
人前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)試劑盒
人鳶尾素(Irisin)檢測(cè)試劑盒
大鼠血管緊張素1-7檢測(cè)試劑盒
HumanSelenoproteinP(SE-P)檢測(cè)試劑盒
大鼠S-100β蛋白檢測(cè)試劑盒
大鼠組織型纖維溶酶激活物(t-PA)檢測(cè)試劑盒
大鼠甲狀腺素(T4)檢測(cè)試劑盒
大鼠γ氨基丁酸(GABA)檢測(cè)試劑盒
大鼠纖溶酶原激活物抑制物(PAI)檢測(cè)試劑盒
大鼠S-100b蛋白檢測(cè)試劑盒
大鼠丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
大鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒
大鼠一氧化氮(NO)檢測(cè)試劑盒
大鼠酸性鐵蛋白(AIF)檢測(cè)試劑盒
大鼠誘導(dǎo)型NO合酶(iNOS)檢測(cè)試劑盒
大鼠神經(jīng)型NO合酶(nNOS)檢測(cè)試劑盒
大鼠內(nèi)皮型NO合酶(eNOS)檢測(cè)試劑盒
大鼠促胰液素(secretin)檢測(cè)試劑盒
大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子1(Smad1)檢測(cè)試劑盒
大鼠前列腺素E2(PGE2)檢測(cè)試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測(cè)試劑盒
大鼠(Cortisol)檢測(cè)試劑盒
大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)檢測(cè)試劑盒
大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CysC)檢測(cè)試劑盒
大鼠生長(zhǎng)抑素(SS)檢測(cè)試劑盒
大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)檢測(cè)試劑盒
大鼠去甲腎上腺素(NE)檢測(cè)試劑盒
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測(cè)試劑盒
大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)檢測(cè)試劑盒
大鼠間羥腎上腺素(MN)檢測(cè)試劑盒
大鼠半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-12)檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)檢測(cè)試劑盒
大鼠D-乳酸檢測(cè)試劑盒
大鼠二氨氧化酶(DAO)檢測(cè)試劑盒
大鼠白細(xì)胞介素8(IL-8)檢測(cè)試劑盒
大鼠皮質(zhì)酮(CS)檢測(cè)試劑盒
大鼠5羥色胺(5HT)檢測(cè)試劑盒
大鼠胰脂肪酸檢測(cè)試劑盒
大鼠透明質(zhì)酸(HA)檢測(cè)試劑盒
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒
大鼠白細(xì)胞介素13(IL-13)檢測(cè)試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)檢測(cè)試劑盒
大鼠γ干擾素(IFN-γ)檢測(cè)試劑盒
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)檢測(cè)試劑盒
大鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測(cè)試劑盒
大鼠酪氨酸激酶B(TrkB)檢測(cè)試劑盒
大鼠C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒
大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)檢測(cè)試劑盒
大鼠雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒
大鼠促卵泡激素(FSH)檢測(cè)試劑盒
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)檢測(cè)試劑盒
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測(cè)試劑盒
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白c(SP-c)檢測(cè)試劑盒
大鼠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)檢測(cè)試劑盒
大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒
大鼠多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒
大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)檢測(cè)試劑盒
大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3)檢測(cè)試劑盒
大鼠總甲狀腺激素(TT4)檢測(cè)試劑盒
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